Меню Закрыть

Кроссоверы j класса: Среднеразмерный внедорожник J класса в России

Содержание

Топ-5 кроссоверов БМВ

У каждого автомобилиста свои интересы при покупке автомобилей немецкой марки BMW. Кому-то нужен автомобиль для постоянной работы, а кому-то – для демонстрации статуса и индивидуальности. При этом акцент в любом случае делается на такие характеристики, как надежность, привлекательность исполнения, комфорт салона, наличие премиальных опций. Производитель немецких кроссоверов представляет большой модельный ряд, где каждый может выбрать автомобиль в зависимости от преследуемых целей и явных симпатий.

БМВ Х3 – среднеразмерный SUV


BMW Х3 – это компактный спортивно-унитарный автомобиль, люкс класса. В нем сочетаются мощь эстетики, бескомпромиссность динамики, неограниченность возможностей, универсальность. Немецкий кроссовер ВМW Х3 выпускается с задним и полным приводом и главным образом используется в качестве престижного транспортного средства для передвижения в городской среде. Последнее поколение компактного SUV настолько популярно, что его выбирают более 150 тысяч автолюбителей в год. Это и понятно, поскольку он оснащен мощным (326 л.с.), но экономным (7,3-7,0 литров на 100 км.) бензиновым мотором, 8-ми ступенчатой АКПП, инновационными системами управления и возможностью всегда находиться на связи.

Легендарный БМВ Х5


Этот баварский кроссовер относится к категории спортивных машин для активного отдыха с предпочтением движения по асфальту. Он выпускается с задним и интеллектуальным полным приводом и его основная концепция – это сочетания драйва, отменной управляемости, безупречной комфортности и превосходной динамики. Среднеразмерный внедорожник ВМW Х5 премиального класса со спортивным характером раскупается со скоростью больше 100 тысяч автомобилей в год. Ведь такой стильный, элегантный и сильный автомобиль просто невозможно не заметить и не выделить в потоке других машин.

Флагманский БМВ Х7


Полноразмерный внедорожник с системой полного интеллектуального привода сочетает в себе внушительность внешнего вида, роскошь и простор салона, инновационное техническое оснащение. И не зря ВМW Х7 относят к категории флагманских авто, поскольку ему отдают предпочтения люди с солидным достатком, которые стремятся подчеркнуть не только статус, но и индивидуальность. Спортивный мощный кроссовер универсален, поскольку ему подвластны и отличные автобаны, и грунтовые дороги. Несмотря на гигантские размеры, авто выглядит элегантно, благодаря пропорциональности всех элементов экстерьера. Породистость оснащенности ощущается в каждой детали: начиная от натуральной кожи отделки в сочетании с элитной древесиной и алюминием, закачивая инновационной электронной начинкой, обеспечивающей отменную связь, навигацию, информацию о работе всех систем.

Заряженный БМВ Х6 М

Немецкий кроссовер относится к категории полноприводных спортивных купе премиального класса. Ему предпочтение отдают материально обеспеченные люди, проживающие в условиях мегаполисов и крупных городов. Их вдохновляет на покупку динамичность характеристик, отличные скоростные и маневренные качества, заметность и узнаваемость в дорожном потоке. Последнее поколение немецкого внедорожника ВМW Х6 М отличается модернизированным, технологичным двигателем, агрессивным дизайном кузова, породистостью интерьера салона. Бензиновый мотор объемом 4,4 литра, способный генерировать мощность до 625 лошадиных сил, агрегирован с 8-ми диапазонной коробкой-автоматом. При этом кузов дополнительно усилен, тормоза усовершенствованы, а шасси оснащено системой адаптации к конкретному состоянию дорожного полотна. Это гарантирует отличную управляемость, устойчивость и безопасность. Максимально развиваемая скорость до 250 километров в час ограничена электроникой.

Премиальный SUV БМВ Х6

Кроссовер люкс класса является родоначальником спортивных купе для активного отдыха. Он сочетает в себе лучшие качества внедорожника (большая величина дорожного просвета, полный привод, отличные качества адаптивных подвесок) и купе (конфигурация кузова, превосходная обтекаемость и аэродинамика). Спортивно-унитарные кроссоверы ВМW Х6 последней генерации оснащены линейкой моторов объемом 3, 4,4 кубических дециметра. Наибольшая величина мощность до 530 лошадиных сил. Все силовые агрегаты работают совместно с 8-ми скоростной коробкой-автоматом. Продажи ведутся по всему миру и составляют более 40 тысяч моделей в год, что свидетельствует о популярности премиального немецкого кроссовера.

Модельный ряд Баварских кроссоверов

Отличительными особенностями всех кроссоверов BMW является неприхотливость и непритязательность к состоянию дорожного полотна, безупречная управляемость, устойчивость, маневренность, мощность силовых установок. Однако модели люкс класса предпочитают движение по обустроенному асфальтовому покрытию в условиях городской среды. Для всего модельного ряда кроссоверов немецкого бренда БМВ характерны:

  • элегантный спортивный внешний вид, порой с элементами агрессивности;
  • высокая степень комфорта салона, оснащенность инновационными системами связи, телекоммуникации, навигации и контроля состояния всех систем автомобиля;
  • высокая технологичность двигательных агрегатов, трансмиссионной, тормозной, подвесной системы;
  • мультифункциональность рулевого управления;
  • максимальная оснащенность системами активной и пассивной безопасности.

Купить немецкий кроссовер премиального класса различной модели можно в салоне официального дилера BMW.

Что лучше: Кроссовер или седан?

5 (пять) преимуществ авто-кроссоверов и авто-седанов,- Битва продолжается.

 

Нет наверное такого владельца авто-седана, который не заглядывался бы на тот же авто-кроссовер. И действительно, автомобильный рынок внедорожников за последние годы переживает какой-то невероятный бум. Спрос на автомашины кроссоверы наблюдается сегодня по всему миру. Это связано конкретно с тем (по мнению многих граждан), что эти автомобили класса SUV более универсальны и более практичны по сравнению с автомобилями седанами и универсалами. В конечном итоге многие автоводители стали сегодня отказываться от легковых автомобилей в пользу кроссоверов и внедорожников. Но на самом деле этот бум не говорит нам о том, что автомобили класса SUV безоговорочно победили и выиграли у  остальных классов машин на мировом авторынке.

 

А дело в том, что автомобили кроссоверы на самом деле тоже имеют свои как-бы плюсы и минусы, как и обычные легковые автомобили седаны. Так что друзья не будем торопиться с выводами, вопрос о том, какой автомобиль лучше еще далеко не решен. Если же вы господа пока тоже еще не определились с выбором, что вам купить в собственность, автомобиль кроссовер или седан, то мы предлагаем вам сегодня узнать из нашей публикации 5 (пять) основных причин, по которым лучшим выборов является все-же покупка автомобиля внедорожника, а также такие же 5 (пять) причин в другом уже плане, почему все-же стоит приобрести для себя автомобиль марки седан.

 

Автомобиль кроссовер — Это большое грузовое пространство

 

Авто-кроссоверы с самого начала своего появления на рынке всегда были более вместительными по сравнению с теми же автомобилями седанами. Например, объем багажника авто-кроссовера 2016 Honda Accord составляет 495 литров. Но этот кроссовер Honda CR-V имеет еще и поразительный объем грузового пространства, которое составляет 589 литров.

 

Смотрите также: Внедорожник или универсал,- что выбрать?

 

Если же в модели авто CR-V сложить задние сиденья, то объем грузового пространства в машине составит 1669 литров. И это с учетом того, что автомобиль седан Honda Accord больше этого кроссовера по габаритным размерам. 

Так  примеру, если для вас размер багажника все-же играет важное значение, то безусловно, лучшим выбором для вас будет являться автомобиль марки кроссовер. Это одно из главных преимуществ любого из кроссоверов. 

 

Автомобиль кроссовер — Система полного привода 4WD / AWD

 

Большинство из нас граждан живет в регионе, где в зимние время погода дарит многим из нас каждодневные сюрпризы в виде ледяного дождя, снега, града и т.п. осадков, превращая наши российские дороги в зимнюю раллийную трассу, или в каток, или в полное зимнее бездорожье. Естественно, что каждый водитель знает о том, что любому автомобилю для надежного сцепления с дорогой необходима качественная зимняя резина.

 

Но неполноприводные легковые машины в зимнее время заметно проигрывают тем же полноприводным автомобилям даже с самыми дорогими зимними шипованными шинами. Но еще больше таких преимуществ в зимнее время конечно же у автомашин кроссоверов и внедорожников, которые оснащены системами полного привода 4WD и AWD.

 

Дело в следующем, помимо передачи крутящего момента на все четыре колеса кроссоверы имеют, как правило у себя, увеличенный дорожный просвет, что вполне актуально зимой на заснеженных дорогах, на улицах городов и в переулках.

Это позволяет водителям таких машин не испытывать зимой каких-либо трудностей  даже на проселочных дорогах в не черте города (за городом). Так что друзья, если вам нужно или приходится зимой ездить на дачу или в деревню, то вам лучше всего нужно будет купить всепогодный полноприводный автомобиль кроссовер, поскольку он заметно выигрывает по той же проходимости у легкового автомобиля седана. 

 

Автомобиль кроссовер — Высокая посадка

 

Одной из причин, почему кроссоверы стали популярны во всем мире является высокая посадка в них водителя. Благодаря высоте кроссоверов сиденья в салоне машины расположены достаточно высоко, что обеспечивает водителю и его пассажирам также более высокую посадку, чем в любом другом легковом авто-седане. Ну а эта высокая посадка обеспечивает водителю естественно и лучшую обзорность на дороге.

 

Например, водителю любого такого кроссовера открывается хорошая обзорность на несколько автомобилей вперед и в итоге, управлять этим кроссовером становится более комфортно и безопасней, так как водитель из машины может заранее видеть, что происходит впереди других идущих машин. 

 

Благодаря этому водители и пассажиры чувствуют себя в авто-кроссоверах намного комфортней и спокойней. А это главный из критериев для любого автопроизводителя, чтоб его продукция отвечала максимальным критериям комфортности. Ведь в нашем современном мире для владельцев автомашин это и есть самое главное. 

 

Автомобиль кроссовер — Бездорожье

 

Многие владельцы авто-седанов мечтают поездить по бездорожью и просёлочным дорогам. В большинстве случаев это не возможно. К нашему сожалению, легковые автомобили не предназначены для эксплуатации их вне асфальтированной дороги. Естественно, если вы такой любитель рыть грязь в лесу или желаете проезжать по затопленным участкам дороги не опасаясь в них застрять, то лучшим выбором для вас непременно должны являться автотранспортные средства большой проходимости класса SUV.

Да, безусловно, вы можете купить себе и легковой раллийный автомобиль, нет проблем, но все-же лучшим решением для вас будет являться автомобиль кроссовер или полноценный автомобиль внедорожник.

 

Автомобиль кроссовер — Быть в тренде

 

Если вы следите за модой товаров народного потребления не только по всему миру, но желаете быть еще в тренде и в мировом автомире, то вам безусловно стоит приобрести себе или авто-кроссовер, или внедорожник, поскольку в наши дни это для них реально их рынок. И надо признать, что доля автомобилей седанов на авторынке по всему миру будет снижаться. И этого не избежать. Практически все автомобильные компании не могут обойти стороной поднявшийся бум на рынке машин кроссоверов и внедорожников, который наблюдается сегодня по всему миру. Поэтому надо учесть, пока у автопроизводителей есть возможность получать максимальные прибыли на рынке машин серии SUV, то они непременно будут производить и конструировать все новые внедорожные модели машин.

 

К большому сожалению, без ущерба автомобилям седанам такое развитие авто-кроссоверов сегодня просто невозможно. Естественно, что многие автомобильные бренды вынуждены снижать свои инвестиции в разработку новых легковых автомобилей в кузове седан, смещая тем самым свой интерес в сторону автомашин кроссоверов. 

 

Примечательно и то, что это коснулось даже самых мощных легковых авто-седанов, альтернативы которым до недавнего времени на мировом рыне фактически не было. Но сегодня в наши дни многие автопроизводители стали выпускать на рынок достаточно мощные автомобили кроссоверы и внедорожники, которые по своим техническим характеристикам ни сколько не уступают легковым авто-седанам. 

И эта тенденция будет только продолжаться. Так что друзья в ближайшие годы мы с вами увидим еще больше моделей мощных автомобилей кроссоверов и внедорожников с потрясающими техническими характеристиками, которые ранее можно было встретить только лишь на «заряженных» седанах. 

 

Таким образом, если вы ищите для себя мощную модель автомобиля, то вам теперь нет необходимости в обязательном поряде приобретать именно легковой автомобиль. В наши дни на рынке машин появилось уже немалое количество очень мощных автомобилей кроссоверов и внедорожников, которые не только не уступают по своей производительности авто-седанам, но и имеют ряд определенных преимуществ перед этими легковыми автомобиля, о которых мы рассказали вам выше. 

 

Автомобиль седан — Экономия топлива

 

Несмотря на то, что автомобили кроссоверы проделали длинный путь в своем развитии начиная от не экономичных транспортных средств в сторону новых технологий, которые помогают им экономить топливо, все-же они так и не смогли отнять преимущество у легковых автомобилей седанов до сегодняшних пор. Примечательно, что не получилось им этого сделать (отнять первенство) даже и у гибридных автомобилей кроссоверов. Все-равно эти гибридные авто-седаны существенно экономичней.

 

Безусловно, дело все в «парусности» автомобилей класса SUV, которая приводит к увеличенному аэродинамическому сопротивлению воздуха. Надо здесь признать, что у седанов этот показатель (азродинамика) существенно выше. Плюс к этому естественно и вес кузова, который у автомобилей кроссоверов естественно тяжелее. В итоге получается, что легковые автомобили намного экономичней тех же кроссоверов и внедорожников.

 

Таким образом, если экономия топлива для вас является главным при выборе автомобиля и вам не нужна универсальность и практичность транспортного средства, то вам стоит приобрести себе автомобиль седан, поскольку он остается безусловным лидером по эономичности перед автомобилями класса SUV.

 

Автомобиль седан — Удобный салон

 

Мы уже выше сказали, что автомобили кроссоверы и внедорожники имеют высокую посадку для водителя и для пассажиров, что дает гражданам чувство спокойствия, которое обеспечивается повышенным уровенем комфорта. Но это в том случае, если подходить к данному вопросу со стороны психологии. На практике же все обстоит иначе, по уровню удобства и по комфортности легковые автомобили в кузове седан и универсал заметно обходят своих полноприводных автоконкурентов.

 

Дело в следующем, а именно, что из-за вертикальной посадки сидений в автомашинах кроссоверах при длительных поездках на них пассажиры могут очень сильно уставать. Кроме всего, во многих авто-внедорожниках сиденья достаточно жесткие, что явно говорит не в пользу максимального комфорта. В автомобиле же седане сиденья установлены несколько иным образом и имеют другие углы расположения, которые дают больше возможностей для регулировки автомобильных сидений для максимального комфорта водителя и его пассажирам во время движения.  

В итоге получается, что водитель и пассажиры при поездках в легковом автомобиле чувствуют себя более комфортней чем в кроссовере. Стоит также отметить, что даже при длительных поездках водитель и пассажиры седанов менее устают, чем в автомобилях класса SUV. 

 

Автомобиль седан — Проверенная временем надежная платформа

 

К сожалению, с ростом популярности кроссоверов уровень удовлетворенности автомобилями класса SUV не растет. В чем же причина? Ведь люди покупают внедорожники рассчитывая на их преимущество перед легковыми автомобилями…

 

Но как это ни странно, при опросе автовладельцев кроссоверов многие из них часто жалуются на явные частые проблемы с полноприводными автомобилями, которые связаны в первую очередь с их качеством и надежностью. Почему же многие авто-кроссоверы не так надежны, как те же легковые автомобили? Ведь большинство современных авто-внедорожников основаны и построены на базе платформ именно легковых автомоделей. 

 

Однозначно ответить на этот вопрос надо признать, очень тяжело. Здесь безусловно но существует масса различных причин, почему кроссоверы частенько расстраивают своих владельцев. Например, главный враг любого кроссовера — это новая платформа на базе которой выпускается та или иная модель автомашины. Ведь в погоне за прибылью многие автокомпании торопятся при проектировании, при разработке и при тестирование внедорожных моделей машин. В конечном итоге это как-раз и приводит к частым просчетам и недоделкам.

 

Кроме того, из-за того что многие внедорожники и кроссоверы основаны на платформе легковых машин, то они фактически не получают для себя каких-то новых модернизаций в подвеске, что в конечном итоге приводит к ее быстрому износу. Это происходит прежде всего из-за того, что во многих моделях кроссоверов конструкция подвески со временем просто не выдерживает вес автомобиля, который естественно значительно больше по сравнению с теми же легковыми автомобилями. 

 

Иногда автомобильные компании пытаясь создать надежный кроссовер, используют платформу универсалов или автомобилей седанов немного модернизируя в нем  саму архитектуру, в расчете на то, что их новая модель будет качественной. А порой, у автопроизводителей неплохо получается создавать действительно потрясающие модели кроссоверов, которые в полне надежны и качественны. Но чаще случается и получается все наоборот. 

 

В отличии от авто-кроссоверов автомобили седаны более надежны и проверены временем. Ведь многие легковые автомобили выпускаются на базе старых классических платформ, которые с течением времени были доработаны до совершенства и фактического идеала. Согласитесь с нами, что времени более чем в 100 лет было вполне достаточно, чтобы современные легковые автомобили стали практически идеальными в отличие от тех же кроссоверов, которые в своем принципе несмотря на массовость все еще находятся в начале своего пути развития. 

 

Так что друзья, приобретая себе седан вы будете заранее знать, что вы от него получите. Когда как покупка автомобиля кроссовера является в принципе приобретением как-бы «кота в мешке». Так что помните, если вы все-таки решились приобрести себе автомобиль внедорожник, то всегда будьте готовы от него к любым сюрпризам. Но то что вы будете тратить на этот внедорожник существенно больше денег на обслуживание, так это однозначно. Готовьтесь заранее. Стоимость запасных компонентов, а также стоимость ремонта и планового ТО для автомобилей кроссоверов существенно выше, чем для легковых седанов. 

 

Если же вы не готовы переплачивать за кроссовер, то лучшим выбором для вас безусловно должен быть автомобиль седан. 

 

Автомобиль седан — Видимость и обзорность 

 

Вы наверное обратили внимание, как цифровые технологии захватывают автомобильную промышленность? Особенно резво развиваются технологии в области помощи водителям во время движения за рулем автомобиля. Одна из самых быстроразвивающихся систем, что стала массово появляться на современных автомобилях, это функция помощи при парковке задним ходом. Вы наверное заметили, как быстро эта опция перекочевала с дорогих премиальных автомобилей на обычные транспортные средства эконом класса? И безусловно, в этом нет ничего плохого. 

 

Но мало кто из вас друзья знает, что с момента появления данной функции видео- помощи при парковке, эта опция в первую очередь устанавливалась на автомобилях кроссоверах. Вы не задумывались почему? Конечно же это сделано не просто так и не только для маркетинга. Дело в следующем, что эти автомобили внедорожники и кроссоверы из-за своих размеров имеют существенно худшую обзорность.

 

То есть количество слепых зон в автомашинах класса SUV намного больше, чем в легковых авто-седанах. Особенно плохая ведомость в авто-кроссоверах и внедорожниках наблюдается при их парковке задним ходом. Вот где незаменима видео-камера на крышке багажника, которая передает видео изображение того что происходит позади при движении машины задним ходом. 

 

По той же самой причине появились и другие более продвинутые технологии помощи водителю при паркинге. Например, в настоящий момент многие автомобильные компании стали оснащать свои легковые так и внедорожные автомобили системой 360-градусного обзора вокруг машины, который проецируется прямо на ЖК-экран информационно-развлекательной системы.

 

Подобная обзорность пространства вокруг машины достигается за счет нескольких видео камер расположенных с каждой стороны автомобиля. 

Естественно, что из-за плохой обзорности кроссоверов и внедорожников эта система кругового обзора при парковке незаменима для автомобилей класса SUV. Так что системы помощи водителям, появившиеся во многих автомобилях кроссоверах, сегодня также стали применяться и на легковых автомобилях делая их таким образом еще комфортней и еще безопасней.  

 

Да, безусловно не стоит забывать и о том, что не каждый автомобиль седан может похвастаться потрясающей видимостью при нахождении за рулем. Например, автомодель Mercedes-Benz CLA имеет у себя очень плохую обзорность и возможно по видимости даже уступает многим современным авто-кроссоверам. Но чаще всего авто-седаны имеют более лучшую видимость (обзорность).

 

Так что друзья за рулем авто-седана Honda Accord или седана BMW 5-й серии обзорность дороги и пространства вокруг машины намного лучше, чем в кроссовере CR-V или в BMW X5. 

Поверьте лично на опыте, на легковом автомобиле вам будет намного легче  припарковаться, чем на том же внедорожнике созданном на той же самой платформе. 

 

Автомобиль седан — Дизайн

 

Конечно, есть такие люди для которых самыми красивыми автомобилями являются хэтчбеки или универсалы. А есть такие, для которых верх совершенством являются спортивные автомобили. Но как говорят,- о вкусах не спорят. Все-равно эти машины не для всех.

 

Смотрите также: Обновленный Honda Accord 2016 года Купе [61 фото]

 

Для остальной части граждан уже долгие годы на авторынке существуют автомобили седаны, модельный ряд которых на мировом авторынке может любому вскружить голову. Причем, что удивительно, большинство этих седанов мало чем похожи друг на друга. Чего нельзя сказать об автомобилях кроссоверах и внедорожниках, которые за последние годы все больше начинают нам напоминать клонов-двойников. 

 

Нет, безусловно, современные авто-кроссоверы и внедорожники нельзя назвать некрасивыми. Среди этого класса автомобилей однозначно есть конечно же и шедевры. Тем более, что любой фактически авто-кроссовер реально смотрится брутальнее и агрессивнее, чем седаны. 

 

Смотрите также: Десять причин купить кроссовер вместо легкового автомобиля

 

Но все-же, если уж говорить о законченном стайлинге, то безусловно, более классический дизайн до сих пор можно увидеть только на автомобилях в кузове седан. И это признают сегодня разные эксперты и критики. В том числе даже те, кто находится без ума от кроссоверов и внедорожников.

 

По мнению огромного количества граждан легковые автомобили в кузове седан более изящны и поэтому выглядят потрясающе. Причем многие модели машин реально являются произведением искусства и заметно обходят по стилю и классике своих внедорожных конкурентов. 

Так что друзья запомните, если вы хотите купить себе автомобиль с лучшим дизайном, то быстрее всего вы найдете его на рынке именно среди легковых автотранспортных средств, чем среди автомашин класса SUV. Хотя это совсем не означает, что среди авто-внедорожников и кроссоверов не существует потрясающих по дизайну автомобилей.  

Топ-12 самых быстрых кроссоверов в России — журнал За рулем

Немцы, немцы, снова немцы, а также англичане, принадлежащие немцам, итальянцы, принадлежащие немцам, и один американец.

Материалы по теме

Кроссоверы хороши благодаря своей универсальности, но представленная дюжина универсальнее всех — они не только готовы штурмовать проселок и бездорожье, но и соперничать с суперкарами по динамике разгона. Да, у них большая масса и высокий центр тяжести, но инженеры нашли способы справиться с этими особенностями, создав уникальные автомобили, характеристики которых не могут не впечатлять.

Но какие из представленных именно на российском рынке кроссоверов самые быстрые? У нас есть ответ.

Mercedes—AMG G 63

Материалы по теме

Удивительно, насколько этот угловатый внедорожник, способный преодолевать броды глубиной до 70 см, может быть быстрым. На скорость 100 км/ч он выходит уже через 4,5 секунды после старта. Из-за дизайна кузова максимальная скорость невелика — всего 240 км/ч. Но представьте себе обтекаемый «Гелик»? Такой модели даже в воображении не существует. Но в модельном ряду Mercedes—Benz есть и кроссоверы. О них — дальше по списку.

Gelandewagen от AMG оснащается двигателем объемом всего 4 литра, но из этого V8 инженеры «выжали» 585 л.с. и 850 Нм, причем без ущерба ресурсу мотора и внедорожным способностям машины. Для интереса: изначально не предназначенный для дрэга Gelandewagen весит практически 2,5 тонны. В версии AMG его масса не уменьшилась. Поэтому некоторые инженеры считают машину чудом.

Aston Martin DBX

Козырем первого кроссовера компании Aston Martin стала отнюдь не динамика. До скорости 100 км/ч автомобиль с обтекаемым кузовом разгоняется за те же 4,5 секунды, что и «квадратный» Gelandewagen. При этом у «англичанина» под капотом установлен тот же внушающий уважение турбированный 4-литровый двигатель V8 от AMG, но дефорсированный до 550 л.с. Работает он в паре с 9-ступенчатым автоматом. Для спринтера DBX слишком тяжел и весит почти 2,3 тонны. Одиннадцатое, а не двенадцатое место, машина заняла только благодаря максимальной скорости, так как обтекаемые линии позволяют ускоряться до 291 км/ч.

Mercedes-AMG GLS

Материалы по теме

В рейтинг попало несколько моделей AMG, но эта — самая статусная и комфортная, хотя и не самая быстрая из-за своей массы, составляющей почти 2,6 тонны. Почему она, будучи тяжелее, обошла G 63, разгоняясь за 4,2 секунды до «сотни»? Ее двигатель, а это тот же 4-литровый блок, форсирован до 612 л.с. без изменения крутящего момента. Несмотря на большую площадь сечения кузова и сильное сопротивление встречному потоку воздуха, практичный кроссовер может разогнаться до 280 км/ч.

BMW X3 M и X4 M

Компактные кроссоверы BMW имеют небольшую массу — чуть более 2 тонн, благодаря чему очень динамичны. До скорости 100 км/ч они разгоняются за 4,1 секунды. Устанавливаемый на эти машины 3-литровый двигатель развивает мощность 510 л.с., что не намного меньше соседей по рейтингу. Но при этом у него всего 600 Нм крутящего момента, а значит двигатель любит обороты, работая во время динамичных разгонов на пределе.

Maserati Levante Trofeo

Экзотический для России кроссовер обладает той же динамикой: версия Trofeo достигает скорости 100 км/ч за 4,1 секунды. Но если не отпускать педаль газа, то кроссовер разгонится до 302 км/ч. При этом под капотом машины стоит тоже не самый объемный мотор. 3,8-литровый V8 имеет мощность 580 л.с. и, что немаловажно при разгоне до сотни, 730 Нм. Масса машины составляет почти 2,2 тонны, а «лишние» 30 л.с. и Нм позволили кроссоверу обойти конкурента от Aston Martin как в разгоне, так и по максимальной скорости.

Bentley Bentayga Speed

Стрелка спидометра самой быстрой версии Бентяги поднимается к цифре 100 всего через 3,9 секунды после старта. Секрет в том, что 2,5-тонный роскошный кроссовер оснащен двигателем W12 объемом 6 литров. Турбонаддув увеличил его мощность до 635 л.с. и 900 Нм. Поэтому ни масса, ни сопротивление воздуха не мешают кроссоверу быть, мягко говоря, непредсказуемым.

BMW X5 M и X6 M

Материалы по теме

Мы не стали разделять и эти две модели BMW, которые, по сути, являются версиями друг друга. При одинаковых моторах и массе они обладают идентичной динамикой — 3,8 секунды до 100 км/ч. Оснащаются кроссовер и кросс-купе 4,4-литровым двигателем мощностью 625 л.с. и 750 Нм. К сожалению, максимальная скорость этих 2,4-тонных машин ограничена электроникой на отметке 250 км/ч, что, признаться, больше похоже на недоверие к мастерству водителей, чем на сознательность.

Mercedes—AMG GLC

Этот Мерседес всего на 20 кг легче основного конкурента от BMW, но благодаря мотору объемом 4 литра, крутящий момент которого при тех же «лошадях» (510 л.с.) заметно выше (700 Нм), он делит третье место по динамике с тремя другими более дорогими моделями кроссоверов. Скорости 100 км/ч GLC достигает всего через 3,8 секунды после старта. Это и делает автомобиль особенно интересным для тех, кто любит драйв без переплат. Кроме того, модель представлена в двух кузовах — как практичный универсал, так и эффектный кросс-купе.

Mercedes—AMG GLE

Более легкий GLE в версии AMG получил ту же версию двигателя, которая устанавливается на GLS — легкий 612-сильный V8 объемом 4 литра. Результатом стал очень комфортный кроссовер, динамика которого сопоставима с некоторыми купе. Например, Bentley Continental GT разгоняется до сотни за 3,7 секунды, а Mercedes—AMG GLE — за 3,8 секунды. Как и GLC, кроссовер в версии AMG представлен в двух кузовах.

Porsche Cayenne Turbo S E-Hybrid Coupe

Вопреки американской поговорке «There is no replacement for displacement» (нет замены для объема), замена есть. И это электромотор, у которого никакого объема нет вовсе. Бензиновый 4-литровый мотор кросс-купе имеет мощность 550 л.с. и 770 Нм, а электродвигатель — 136 л.с и 400 (!) Нм. В итоге суммарная мощность установки достигает 680 л.с. и 900 Нм. Это позволяет 2,6-тонному кросс-купе разгоняться до 100 км/ч за 3,8 секунды и достигать скорости 295 км/ч. Но забудьте о бездорожье. Например, глубина преодолеваемого брода этой версии Cayenne составляет всего 28 см.

Jeep Grand Cherokee SRT Trackhawk

Эта малоизвестная версия модели удивляет всех. Как 2,5-тонный Jeep может разгоняться до 100 км/ч всего за… 3,7 секунды? Исключительно благодаря объему двигателя, как принято у американцев. Trackhawk оснащен 6,2-литровым бензиновым мотором HEMI V8, мощность которого, благодаря турбонаддуву, увеличена до 717 л.с. и 875 Нм. При этом автомобиль остался внедорожником, а его цена удивительно невысокая для машины, занявшей второе место нашего рейтинга.

Lamborghini Urus

Материалы по теме

Самым быстрым кроссовером в России стал представитель еще одного итальянского бренда. Этим модель обязана не только мощному двигателю, но и малой по меркам класса массе. Она весит всего 2,2 тонны, как Maserati, но мощность 4-литрового мотора машины достигает 650 л.с. В результате рекордсмен разгоняется до 100 км/ч за 3,6 секунды, развивая скорость 305 км/ч.

Наверняка вам интересно, какие кроссоверы находятся ближе других к неудержимой дюжине. Это, например, Audi SQ8 и SQ7, способные разгоняться до сотни за 4,8 секунды. Немного степеннее оказался Mercedes—Maybach GLS, достигающий этой отметки через 4,9 секунды после старта. Тот же результат — у специфического для нашего рынка Mini Countryman JCW. Далее следует самый дорогой внедорожник Rolls-Royce Cullinan (5,2 секунды до 100 км/ч) и популярный Range Rover (5,4 секунды).

12 самых быстрых кроссоверов в России (на место повлияла также максимальная скорость и мощность двигателя)

Место

Марка, модель

Разгон до 100 км/ч, сек.

Максимальная скорость, км/ч

Мощность двигателя, л.с. / Нм

1

Lamborghini Urus

3,6

305

650/850

2

Jeep Grand Cherokee SRT Trackhawk

3,7

290

717/850

3

Porsche Cayenne Turbo S E-Hybrid Coupe

3,8

295

680/900

4

Mercedes-AMG GLE

3,8

280

612/850

5

Mercedes-AMG GLC

3,8

280

510/700

6

BMW X5 M и X6 M

3,8

250

625/750

7

Bentley Bentayga Speed

3,9

306

635/900

8

Maserati Levante

4,1

302

580/730

9

BMW X3 M и X4 M

4,1

250

510/600

10

Mercedes-AMG GLS

4,2

280

612/850

11

Aston Martin DBX

4,5

291

550/700

12

Mercedes-AMG G

4,5

240

585/850

  • О новом рекорде скорости среди серийных автомобилей, установленном в этом месяце, вы можете узнать здесь.

Фото: Lamborghini, Jeep, Porsche, Mercedes-Benz, BMW, Bentley, Maserati, Aston Martin

ТОП кроссоверов в Украине — Рейтинг лучших кроссоверов бюджетного, премиум класса

Автомобили прочно вошли в жизнь современного человека. В 2020 году уже невозможно представить себе человечество без данных средств передвижения. Особой востребованностью сегодня пользуются небольшие внедорожники, именуемые кроссоверами. Кроссовер – это сравнительно молодой тип кузова, который во многом схож с конструкцией настоящего внедорожника. Вместе с тем, в качестве основы при производстве применяется платформа стандартного легкового автомобиля. Этот вид транспортных средств можно охарактеризовать, как универсал, увеличенный в размерах и внешне похожий на внедорожник.

Отметим, что бюджетный внедорожник может по своим ходовым характеристикам ничем не отличаться от обычного легкового авто. Однако, некоторые модели могут иметь полный привод и хорошо показывать себя на плохих дорогах. Если перед вами стоит вопрос относительного того, какой кроссовер выбрать? То здесь стоит руководствоваться собственными нуждами и финансовыми возможностями.

Главные достоинства кроссоверов

Современный автомобильный рынок переполнен транспортными средствами данного типа. Абсолютно все производители стремятся предоставить своим покупателям качественный джип, который будет хорошо показывать себя и в городским условиях, и в случае выезда за пределы нормальных дорог. Сегодня дорогие и бюджетные кроссоверы в Украине находятся на пике популярности. Это обусловлено преимуществами автомобилей этого класса. Кроссоверы могут похвастаться:

  • неплохой проходимостью, обеспеченной высоким клиренсом (в некоторых случаях полным приводом),
  • хорошей безопасностью. Помимо наличия большого числа инновационных защитных систем, улучшенная защищенность данных авто обеспечивается благодаря более внушительным размерам и весу (в сравнении с легковыми моделями),
  • вместительным и комфортным внутренним салоном. Во внутреннем пространстве таких транспортных средств смогут с комфортом расположиться 4-7 пассажиров и водитель. Есть вариации с тремя рядами сидений. Многие модели оснащаются складывающимся вторым (и третьим) рядом сидений. Это позволяет перевозить крупногабаритные вещи,
  • респектабельным, престижным внешним видом. Самые лучшие кроссоверы ничем не уступают по привлекательности элитным внедорожным аналогам,
  • удобством управления. Водительское кресло в кроссоверах расположено выше, нежели в легковых автомобилях. Благодаря этому водитель получает хороший обзор.

Классы кроссоверов

Перед тем, как выбрать внедорожник данного типа, стоит определиться с его классом. Интерес покупателей к этому типу авто стимулирует автопроизводителей на выпуск моделей с различными характеристиками. В настоящий момент времени можно выделить следующие подклассы кроссоверов:

  • полноразмерный,
  • среднеразмерный,
  • компактный,
  • мини либо субкомпактный.

Если говорить о полноразмерном классе, то здесь присутствуют модели, отличающиеся внушительными размерами. Это некое переходное звено между легковыми автомобилями и полноценными внедорожниками. Главный упор в этих моделях делается на максимальное сходство с утилитарными аналогами. В этом подклассе представлены полноприводные автомобили, которые могут справляться с легким бездорожьем.

Среднеразмерные кроссоверы отличаются значительно меньшими размерами, нежели вышерассмотренные модели. Это надежный и многофункциональный тип транспорта, который может использоваться для различных целей. Если вы желаете купить либо арендовать машину для городского передвижения и нечастых поездок на природу, то это идеальный выбор.

Среди наиболее известных и популярных представителей этого класса можно выделить следующие модели авто:

  • Kia Sorento,
  • Chery Tiggo,
  • Citroen C5 Aircross,
  • Hyundai Tucson.

Компактные кроссоверы – подкатегория, где представлены сравнительно дешевые модели. Такие недорогие кроссоверы создаются на платформе автомобилей класса В+ либо С. Габаритные размеры таких авто могут вмещаться в рамках стандарта «гольф-класса». В рейтинг лучших компактных кроссоверов можно поставить:

  • Skoda Karoq,
  • Toyota RAV4,
  • Ford Kuga.

Модели из субкомпактного класса больше схожи с обычными легковыми машинами с повышенными показателями проходимости. Эти недорогие внедорожники можно легко перепутать с иными видами кузовов. К наиболее ярким примерам класса мини можно отнести:

  • Nissan Juke,
  • Kia Soul,
  • Ford EcoSport.

Особенности выбора кроссовера

Не имеет значение выбираете ли вы кроссовер в автосалоне либо просто желаете арендовать этот тип транспорта на короткий срок, необходимо руководствоваться общими правилами. Так, во время выбора компактного внедорожника, нужно обращать внимание на:

  • число пассажиров. Компактные кроссоверы редко вмещают больше 5 людей. Поэтому, если вам необходим транспорт для 6-7 пассажиров, то стоит отдать предпочтение автомобилям из полноразмерного класса. Такие авто, нередко, оснащаются третьим рядом сидений,
  • количество багажа. Необходимо ознакомиться с размером грузового отсека авто и постараться представить себе сумки, палатки, рюкзаки, кухонное оборудование и еду, которая будет взята людьми в путешествие,
  • маршрут следования. Город либо бездорожье – один из основных критериев выбора авто. Если вы планируете часто выезжать на природу, то полный привод будет очень полезен. Также необходимо обращать внимание на клиренс машины. Некоторые модели кроссоверов не могут похвастаться большим дорожным просветом и не имеют специальных «электронных помощников» для преодоления бездорожья. Такие авто подойдут только для городской эксплуатации,
  • возможность эксплуатации в экстремальных условиях. Если вы проживаете в регионе, где снег является таким же распространенным явлениям, как и солнечные лучи, то без полного привода будет сложно обойтись,
  • мощность двигателя и расход топлива. Дизельные ДВС характеризуются большими мощностными показателями и невысоким расходом горючего. Однако, их обслуживание является более дорогостоящим.

Рейтинг лучших кроссоверов

Подбирая кроссовер для личного использования, конечно, нужно обращать внимание и на производителя транспорта. Передовые компании обладают хорошими наработками и могут предложить своим потребителям наиболее качественные модели авто.

ТОП кроссоверов из бюджетной категории

  1. Hyundai Tucson. Считается одним из лучших творений корейской автопромышленности.
  2. Renault Duster. Эта машина паркетник из Франции особенно популярна среди наших автомобилистов. Данный факт обусловлен доступной ценой, большим набором опций уже в базовой комплектации и улучшенными возможностями передвижения по пересеченной местности,
  3. Kia Soul. Отличается совмещением технических нововведений, футуристичным дизайном и спортивным характером. Эту модель очень любят молодые люди,
  4. Ford Eco-Sport. Сравнительно недорогой американец, который создан для городских условий эксплуатации,
  5. Nissan Qashqai. Надежное японское авто, которое отличается стильным уникальным дизайнерским исполнением и массой электронных помощников.

Если определения недорого и надежно для вас не совместимы, то обратите внимание на кроссоверы класса Люкс. Главной целевой аудиторией «люксовых» авто являются самодостаточные люди с неплохим доходом. Выбирая лучший кроссовер для украинских дорог, вам непременно стоит заглянуть в следующий список.

ТОП кроссоверов класса Люкс


  1. Volkswagen Touareg. Внедорожник от немецкого автогиганта всегда славился надежностью, элегантным стилем и престижностью,
  2. BMW X3. Современные технологии, яркий запоминающийся дизайн, качественные отделочные материалы – все это характеризует автомобиль, родившийся в Германии,
  3. Porsche Cayenne. Премиальный представитель в семействе кроссоверов. Многие называют именно Порш самым лучшим современными люксовым кроссовером,
  4. Toyota Highlander. Характеризуется настоящей японской надежностью и способностью вместить большое количество пассажиров (до 8 человек). Это лучший выбор для семей, в которых есть сразу несколько детей,
  5. Audi Q7. Люксовый кроссовер, отличающийся роскошным внешним исполнение, высочайшим уровнем безопасности и богатым салоном.

Компания BLS предлагает взять в аренду кроссовер любого типа. В автопарке компании представлены как компактные недорогие автомобили, так и элитные модели, способные произвести отличное впечатление на окружающих. Кроссоверы подойдут для семейных поездок, торжественных мероприятий, встреч деловых партнеров из аэропортов и обычного передвижения по городу с максимальным комфортом. Кроссовер – это выбор для тех, кто желает получать от жизни самое лучшее.

Лучшие 10-летние кроссоверы в каждом классе

Как небольшие городские кроссоверы, так и большие семейные внедорожники, ломают стереотипы и становятся все более популярными. А если учесть состояние дорог в Украине, то покупка подержанного кроссовера не кажется чем-то не обычным. На протяжении многих лет производители предлагают нам автомобили, которые будут чувствовать себя в своей стихии, как в горной местности, так и в городе на обычных дорогах. Давайте познакомимся с самыми интересными 10-летними моделями разных ценовых категорий.

Рынок подержанных автомобилей полон интересных предложений, которые наверняка понравятся тем, кому нужен небольшой проходимый городской автомобиль или SUV представительского класса. Посмотрим, на что обратить внимание, начиная с лучших предложений в премиум-классе. Рейтинг составлен экспертами польского издания Motofakty.

Премиум класс

Сейчас градация между кроссоверами и внедорожниками становится всё более размытой и классифицировать из становится всё сложнее. В то время как в других сегментах разделение чётко прослеживается, в сегменте кроссоверов и внедорожников разделение происходит по их собственным законам. Примером могут служить следующие модели, которые с уверенностью можно назвать «внедорожными лимузинами», хотя их проходимость под вопросом. Уже давно стало нормой, что внедорожный автомобиль ни разу не выезжал за пределы дорог общего пользования. В последнее же время стали популярными компактные кроссоверы в связи с не плохими внедорожными качествами достаточными для перемещения по дорогам низкого качества.

 – Mercedes ML W164 (2005 – 2011)

 Выпускался с 2005 по 2011 год, был очень популярен и сегодня он доступен в немалых количествах

Под капотом Mercedes ML W164 устанавливались только большие и мощные двигатели. Интересным фактом является наличие гибридной системы 450 Hybrid, предлагаемой в конце производства на основе 3,5-литрового двигателя V6. Данная силовая установка развивала 340 л.с. и 517 Нм  – довольно хорошая производительность. Ускорение от 0 до 100 км/ч занимало 8 секунд, а максимальная скорость достигала 210 км/ч. Что касается других предложений, то водитель мог выбирать между вариантами: 350 с блоком 3.5 л, V6 мощностью 272 л.с.; 500 с двигателем 5.5 л, V8 с мощностью 388 л.с. и ТОПовый вариант – 63 AMG с мощным двигателем 6.2 V8 с 510 л.с. и крутящим моментом 630 Нм, ускорение от 0 до 100 км/ч за 5 секунд впечатляет и по сей день. Что по поводу расхода топлива для этого двигателя? В городе не меньше 25 л на 100 км.

Для Мерседес МВ164 доступен широкий ряд силовых установок

У любителей дизельных двигателей также есть большой выбор. Основным был 280 CDI с двигателем 3.0 л, V6 с 190 л.с. ТОПовой моделью считается 450 CDI, оснащенный 4-литровым блоком V8 мощностью 306 л.с. и крутящим моментом 700 Нм. Спринт до «сотни» занял 6,5 секунды, максимальная скорость достигла 235 км/ч, и все это с разумным средним расходом топлива около 10 л на 100 км.

Интерьер радует высококачетвенной отделкой и премиальными материалами

Mercedes W164 – это большой и дорогой автомобиль, поэтому затраты на обслуживание очень высоки. Речь идет не только о расходе топлива на уровне 15, 20 или даже 25 л на 100 км. Дизельные агрегаты имеют аппетит не только по отношению к дизельному топливу, но и к моторному маслу. Отказы моторных узлов не происходят чаще среднего, однако необходимо следить за турбо нагнетателями и системой впрыска Common Rail. Со временем дело доходит до других проблем: насосы и пневматические амортизаторы подвески часто выходят из строя. Также в системе рулевого управления есть уязвимости, автоматическая коробка передач тоже имеет ряд проблем. Конечно, ремонт всех неисправностей может быть особо дорогостоящим.

– BMW X5 E70 (2006 – 2011)

Второе поколение премиального внедорожника от немецкого автоконцерна

Еще одно предложение – работа баварских инженеров, которые изо всех сил старались сделать свою модель достойной и конкурентоспособной по отношению к Mercedes ML и Audi Q7. Как и положено BMW, модель X5 в кузове E70, несмотря на впечатляющие размеры, характеризуется спортивным акцентом. Конечно, мы получаем реальную силу и агрессивные характеристики в премиальной комплектации М, но более слабые аналоги также обеспечивают хорошую дозу эмоций.

Силовые установки BMW X5 обеспечивают завидные динамические характеристики

После рестайлинга, который состоялся в 2010 году, на кроссовер устанавливали два бензиновых и три дизельных агрегата. Даже самый слабый «бензин» предлагал отличные параметры – версия xDrive35i оснащалась трёхлитровым двигателем R6 мощностью 306 л.с. и крутящим моментом 400 Нм, что позволяло от 0 до 100 км/ч за 6,8 секунды, а средний расход топлива составил около 10 л на 100 км. Более сильная версия xDrive50i была оснащена V образной «восьмеркой» мощностью 407 л.с. с крутящим моментом до 600 Нм. Ускорение от 0 до 100 км/ч занимало 5,5 секунды, максимальная скорость – 250 км/ч. И это даже не М версия!

Интерьер по-немецки лаконичен и удобен

Прежде чем перейти к М пакету, рассмотрим дизельные двигатели. Автолюбители могли выбрать вариант xDrive30d с двигателем 245 л.с., версию xDrive40d – 306 л.с. и самый мощный дизель – xDrive M50d, предлагаемый в конце производства. Эта модель работает с 3-литровым шестицилиндровым рядным двигателем мощностью 381 л.с. и крутящим моментом в 740 Нм. Разгон до 100 км/ч близок к бензиновому аналогу, т.е. составляет 5,4 секунды до «сотни», а максимальная скорость равна 250 км/ч, средний расход топлива – около 8-9 л на 100 км пути.

Внешне М версия отличается раздвоенной системой выхлопа, бамперами, молдингами, порогами, фендерами и соответствующими шильдиками

Самая дорогая модель – упомянутая «М-ка», оснащенная 4,4-литровым двигателем V8, 555 л.с. Максимальный крутящий момент 680 Нм доступен в диапазоне от 1500 до 5650 об/мин, что в любой момент может привести к динамичному ускорению. Этот внедорожник способен ускоряться от 0 до 100 км / ч за 4,7 секунды и достигать 275 км/ч максималки. Средний расход топлива в зависимости от стиля езды составляет около 14-15 л/100 км, но при динамичном вождении этот показатель куда выше.

Неприятности владельцу в BMW X5 E70 может предоставить автоматическая коробка передач. Масло следует регулярно менять, поэтому, если предыдущий владелец пренебрег этим аспектом, коробку передач после пробега в 200 000 км придётся заменить целиком. Поэтому лучше избегать моделей, импортированных из США, которые, в большинстве случаев, находятся в плохом техническом состоянии.

Audi Q7 I (2005 – 2015)

Ауди Ку 7 – просто монстр на колёсах. Таких размеров нет ни у кого из одноклассников

Модель Audi Q7 I в сегменте роскошных внедорожников оказалась чрезвычайно успешной, что делает этот кросс очень желанным на вторичном рынке в этом сегменте. Приглушенная, правильная стилистика, мощная гамма моторов, роскошь и пространство. Всё это про Ауди Ку 7. Кстати, размеры этого автомобиля могут сокрушить даже любителя огромных лимузинов – в конце концов, это больше, чем 5-метровый внедорожник.

Автомобиль в 2009 году прошел первый рестайлинг, который был повторён в 2011 году. Под капотом преобладали преимущественно дизельные агрегаты. Из бензиновых версий можно было выбрать вариант с двигателем 3.0 TFSI с 272 л.с. или 333 л.с. Более мощный двигатель способен разогнать этот 2,5-тонный автомобиль от 0 до 100 км/ч за 6,9 секунды при сжигании в среднем 11-12 л на 100 км пути.

Audi отдаёт преимущество дизельным моторам

Предложения дизельных двигателей были гораздо интереснее. На выбор предлагались 3.0 TDI с 204 л.с. или 245 л.с.,  4.2 TDI V8 мощностью 340 л.с. и колоссальным крутящим моментом 800 Нм. Этого достаточно для того, чтобы Audi Q7 ускорилась до 100 км/ч за 6,4 секунды и достигла максимальной скорости 242 км/ч. Средний расход топлива составляет около 10 литров на 100 км. Однако самым интересным мотором был знаменитый 6-литровый V12 500 л.с. с крутящим моментом 1000 Нм. Благодаря такому сердцу этот большой монстр способен разгоняться от 0 до 100 км/ч всего 5,5 секунды. Средний расход составляет около 12 л/100 км что очень разумно для такого двигателя.

Салон  Audi Q7 настолько огромен, что в нём можно потеряться

При выборе модели с двигателем V8 TDI нужно быть осторожным с системой впрыска, которая часто вызывает проблемы, и ее ремонт может быть очень недешёвым. Иногда катушки зажигания выходят из строя, автоматическая коробка передач и рулевой механизм не славятся долговечностью.

Средний / высокий класс

Это класс, который удовлетворит даже прихотливых водителей, но модели в нем просто не вписались в премиум класс. Их не так много, но они все же ниже в рейтинге.

– Volvo XC90 I (2002 – 2014)

Автомобиль выпускался без серьёзных изменений 12 лет (!), что для автопрома очень много

Volvo XC90, несомненно, близок к премиум-классу. Автомобиль выпускался в течение 12 лет, завоевывая массу преданных поклонников, которые заботятся об этих автомобилях и с гордостью ездят даже сегодня.

Под капотом работают успешные силовые агрегаты как со стороны бензиновых, так и дизельных двигателей. Основным бензиновым двигателем был 2,5-литровый пятицилиндровый двигатель мощностью 210 л.с. Для некоторых более требовательных клиентов был рядный шестицилиндровый агрегат 2.9 л мощностью 272 л.с. с крутящим моментом 380 Нм. Такие параметры позволяли ускоряться от 0 до 100 км/ч за 9,3 секунды и достигать максимальной скорости в 210 км/ч. Спустя несколько лет после дебюта шведы стали устанавливать двигатель 4.4 V8 с 315 л.с. с крутящим моментом 440 Нм.

Двигатели Вольво ХС 90 хорошо себя зарекомендовали

Касательно дизельных двигателей, вначале был только один – D5 объёмом 2,4 литра. Он имел мощность 163 л.с. и крутящий момент 340 Нм. Динамика была скромной – ускорение от 0 до 100 км/ч за 12,3 секунды и максимальная скорость 190 км / ч – но расход топлива был крайне разумным – 9 л на 100 км в смешанном цикле. В 2010 году после рестайлинга ассортимент моторов включал в себя новое поколение дизельных агрегатов D3 и D5 объёмом 2,4 литра и мощностью 163 и 200 л.с соответственно.

Интерьер Вольво просто и лаконичен

Первое поколение Volvo XC90 – отличный автомобиль, но он не пользуется репутацией крайне надежного автомобиля. Многие проблемы вызваны системой КПП – если утечки и неисправности не обнаружены и устранены своевременно, последующий ремонт может быть очень дорогостоящим. Также при покупке необходимо проверить состояние и уровень масла в коробке – как в механической, так и автоматической трансмиссии. Обычно проблемы у этих машин вызваны халатностью владельцев. Если правильно ухаживать за XC90, то серьёзных проблем с ним возникнуть не должно.

– Mitsubishi Outlander II (2006 – 2011)

Один из первых кроссоверов, куда можно было установить третий ряд сидений

Второе поколение Outlander дебютировало в 2005 году, но только через год он попал на рынок Европы. Это одна из самых популярных моделей японского автопроизводителя. Вторая версия была намного удобнее и просторнее, чем его предшественник, в то время как огромный багажник – 771/1691 литров – завоевал признание больших семей. Более того, можно было установить третий ряд сидений, который не часто встречался в 10-летних автомобилях.

  Для Аутлендера доступно не большое количество моторов

Вначале выпуска предлагались 2,4-литровый бензиновый двигатель MIVEC мощностью 170 л.с. и турбодизель 2.0 D-ID мощностью 140 л.с. Позже в гамму моторов присоединился более мощный дизельный агрегат 2,2 D-ID мощностью 156 л.с. с крутящим моментом 380 Нм. Спринт до сотни занимает 11,1 секунды, а максимальная скорость – 200 км/ч.

Интерьер без изысков

Серьёзные проблемы владельцу может обеспечить 2.0 D-ID двигатель, у которого довольно часто появляются трещины в ГБЦ. 2.2 D-ID двигатель выглядит намного лучше с точки зрения надёжности, но здесь вы нужно следить за фильтрами твердых частиц – регулярное вождение за пределами города – это рецепт для долгосрочного использования.

Jeep Grand Cherokee III (2005 – 2010)

Jeep Grand Cherokee с точки зрения двигателей – это полная противоположность Mitsubishi Outlander – здесь большие объёмы, высокая мощность и никаких ограничений с точки зрения экологии.

Самый маленький бензиновый агрегат был 3.7 V6 с 201 л.с. Более мощные экземпляры предлагались только с V-образными восьмерками объёмом от 4,7 до 6,1 литра и мощностью от 231 до 430 л.с. в версии SRT-8. Самая сильная версия, помимо мощности 430 л.с., также располагает крутящим момент при 570 Нм, что приводит к отличной производительности. Ускорение от 0 до 100 км/ч занимает всего 5 секунд, а максимальная скорость составляет 270 км/ч. Автомобиль включает в себя не только полный привод, но и модифицированную подвеску, тормозную систему Brembo и выхлопную систему с пониженным сопротивлением, что повышает мощность и делает звук V8 чище.

Двигатели здесь по-американски большие

Что касается дизельного двигателя, то есть только один вариант – 3.0 V6 CRD с 218 л.с. с крутящим моментом 510 Нм. Разгон до сотни составляет 9,7 секунд, максимальная скорость –  210 км/ч, расход топлива – 8 л/100 км – достойный результат для автомобиля весом около 2,2 тонны с приводом 4X4.

Интерьер классический и довольно простой

При покупке Jeep Grand Cherokee обязательно нужно проверить состояние привода 4X4. Поскольку автомобиль довольно смело заявляет о своих внедорожных качествах, владельцы не ограничиваются только вождением на асфальте и с удовольствием путешествуют по неизведанным маршрутам. Проблему также представляют собой система рулевого усилителя, возможен выход из строя электроники – датчики ABS, давления топлива, температуры и т.д.

Популярный класс

Завершает рейтинг класс популярных кроссоверов, то есть автомобилей по разумной цене, которые являются интересной альтернативой семейным универсалам или фургонам. Преимуществом, безусловно, является более высокий дорожный просвет, который необходим на дорогах низкого качества, а также размеры кроссоверов, которые способствуют комфортным путешествиям всё семьёй.

– Honda CR-V III (2006 – 2012)

 Хороший, последовательный стиль, который даже сегодня выглядит свежим и современным, репутация надежного автомобиля с интересной, хотя и не очень обширной палитрой двигателей, является рецептом успеха на европейском рынке.

В 2010 году автомобиль подвергся довольно масштабной модернизации, включая изменения в передней и задней подвеске, что обеспечило улучшение внутреннего комфорта.

Гамма двигателей довольно скромная

Под капотом два бензиновых и два дизельных агрегата. Группа первых представляет 2.0 i-VTEC мощностью 150 л.с. и 2.4 i-VTEC мощностью 170 л.с. Более сильный вариант генерирует 215 Нм крутящего момента, ускоряется от 0 до 100 км/ч за 10 секунд, а максимальная скорость составляет до 190 км/ч. К сожалению, расход топлива в городе может превысить даже 14 л на 100 км пути. 2.2 л дизельные агрегаты мощностью в 140 л.с. или 150 л.с. немного лучше в этом отношении. У более мощного агрегата крутящий момент составляет 350 Нм. Разгон не впечатляет, но средний расход составляет 6-7 л на 100 км, что вполне прилично для автомобиля такого класса.

Интерьер японских авто всегда интересен

Honda очень надежна, и многие пользователи признают, что СТО посещаются только в связи с плановым обслуживанием и заменой жидкостей. Тем не менее, владельцы версий с дизельными двигателями должны следить за форсунками и фильтрами твердых частиц.

Toyota RAV4 III (2006 – 2012)

 Прямой конкурент Honda CR-V – популярный «RAV-4» – по-прежнему пользуется значительной популярностью и довольно охотно покупается на рынке подержанных автомобилей.

Подобно Honda, пользователи хвалят автомобиль за его универсальность и высокую надежность. Интересно, что автомобиль отлично справляется с этой задачей, что является неожиданным в этом сегменте. В 2010 году автомобиль подвергся рестайлингу, что сильно повлияло на его внешний вид, благодаря которому он является современным и свежим по сей день.

Ожидаемо, гамма моторов скромная

Как и подобает японскому автопроизводителю, выбор двигателей скромный и не очень разнообразный. Можно выбрать только один бензиновый двигатель – 2.0 Valvematic с 158 л.с. и 198 Нм крутящего момента – и два дизельных двигателя. Это 2,2 D-4D с мощностью 150 л.с. и 2,2 D-CAT с 177 л.с. Более мощный имеет крутящий момент 400 Нм, ускоряется от 0 до 100 км/ч за 9,3 секунды и достигает максимальной скорости в 200 км/ч. Расход топлива находится на очень приличном уровне – в городе около 8 л, по трассе –  6 л на 100 км.

Интерьер РАВ4 довольно интересен

Проблема RAV4 третьего поколения – это некачественное и не стойкое лакокрасочное покрытие. Также нюансы могут возникнуть с электропроводкой, задней подвеской. Когда речь заходит о двигателях, проблем с бензином нет. В случае дизелей, после 150 000 километров прокладка ГБЦ необходимо менять.

Volkswagen Tiguan I (2007 – 2016)

 Автомобиль пользуется спросом и имеет довольно высокую цену на вторичном рынке.

Основным бензиновым агрегатом является двигатель 1,4 TSI BlueMotion мощностью 122 л.с. и крутящий момент 200 Нм. Ускорение от 0 до 100 км/ч за 11 секунд, максимальная скорость 185 км/ч и средний расход топлива около 7 л на 100 км пути. С другой стороны полюса находится 2,0 TSI 210 PS с крутящим моментом 280 Нм. В этом случае ускорение от 0 до 100 км/ч занимает 7,8 секунды, а максимальная скорость составляет 215 км/ч. Средний расход – около 9 л на 100 км.

Двигатели Тигуана обладают весьма скромными динамическими характеристиками

Самый слабый дизельный двигатель – 2.0 TDI мощностью 110 л.с. с крутящим моментом 280 Нм. Разгон до сотни довольно скромный –  12 секунд и максимальная скорость – 175 км/ч. Но расход топлива находится на хорошем уровне – 5 л на 100 км по трассе и ​​6,5 л на 100 км в городе, что наверняка перекроет не самые выдающиеся динамические характеристики. Для тех, кому мало мощности этих двигателей, предлагается экономичный и мощный двигатель 2,0 TDI SCR мощностью 184 л.с. с крутящим моментом 380 Нм. Здесь ускорение до 100 км/ч занимает 8,3 секунды, а максимальная скорость составляет 204 км/ч, а средний расход топлива составляет около 6 л на 100 км в зависимости от стиля вождения.

  Интерьер довольно строг

Касательно возможных неполадок, в первую очередь это проблемы с двигателем 1.4 TSI, в котором со временем растягивается цепь газораспределения. Во всех двигателях TSI (прямой впрыск бензина) необходимо следить за нагаром на впускных клапанах и своевременно его удалять. Из-за необходимости разбирать ГБЦ, такая услуга очень дорогая. Кроме того, сложность коробки передач DSG делает ремонт дорогостоящим и проблематичным.

Автобизнес

Самые лучшие семейные кроссоверы 2018

Автокомпания Wuling выводит на мировые рынки кроссовер Xingchen

В Китае началось производство кроссовера Wuling Xingchen, с которым совместное предприятие крупного автопроизводителя из Шанхая SAIC (Shanghai Automotive Industry Corporation) и американского General Motors намерена в ближайшее время выйти на глобальные рынки.

По габаритной длине (4594 мм) и колесной базе (2750 мм) этот автомобиль выступает в том же классе, что и популярные среднеразмерные кроссоверы – в частности, он чуть крупнее, чем Kia Sportage и Nissan Qashqai сравним по размерам с Toyota RAV4.

Автомобиль получил современный интерьер, медиасистему с 10-дюймовым экраном и турбированный мотор 1.5, который выдает 147 лошадиных сил.

Wuling Xingchen будет выступать в самом быстрорастущем сегменте кроссоверов. Это стратегический продукт, подготовленный для запланированного в ближайшем будущем расширения присутствия китайской марки на мировом рынке, пишет GM Authority.

Для совместного предприятия американского концерна GM и компании SAIC из Шанхая это первый кроссовер, соответствующий новым производственным стандартам. Сама же компания работает уже почти 20 лет — сотрудничество началось в 2002 году с выпуска на заводе в Лючжоу малотоннажных грузовиков и минивэнов под маркой Wuling наряду с компактными моделями линейки Chevrolet.

Запуску в серию кроссовера Xingchen, который китайцы поставляют на экспорт,

предшествовала масштабная программа испытаний в различных климатических и дорожных условиях.

Кроссовер построен на той же платформе, что и автомобили марки Baojun, построенной американским концерном более 10 лет назад специально для китайского рынка. Согласно официальному заявлению GM, создание нового бренда потребовалось тогда для удовлетворения нарастающего спроса китайских покупателей на недорогие автомобили.

В то же время американская пресса писала, что создание отдельного бренда для местного рынка и передача китайским партнерам технологий были условием со стороны китайской стороны для глобальных концернов, желающих расширять свой бизнес в Китае.

Автопроизводитель из Шанхая располагает значительными средствами, которые необходимы для экспансии на мировые рынки. Так, в первом полугодии 2021 года SAIC увеличила свою выручку на 29% в сравнении с аналогичным периодом прошлого года, до $56,6 млрд, чистая прибыль в тот же период составила $2 млрд. О желании развивать бизнес на Ближнем Востоке, в Австралии, Южной Америке, а также России заявлял ранее финансовый директор SAIC Гу Фэн.

Если китайский бренд предложит российским покупателям достойный продукт, на него вполне может быть спрос, однако открытия производства в нашей стране еще одного крупного игрока из Поднебесной ждать вряд ли стоит, полагают эксперты.

«Мы видим, что предпочтения меняются.

За последние три-четыре года российские покупатели преодолели недоверие к китайским брендам и активно покупают эти автомобили,

— говорит «Газете.Ru» независимый консультант по автопрому Сергей Бургазлиев – Такие абстрактные понятия, как история бренда или ощущение причастности к той или иной марке, отошли на второй план в сравнении с качеством продукта и доступной ценой».

Этим объясняется успех в России таких марок, как Haval, Geely и Chery, добавляет эксперт. Если новинка Wuling не будет уступать им по уровню качества и при этом не будет проблем с поставками, она тоже может пользоваться у нас спросом.

«В рамках глобальной экспансии российский рынок может представлять интерес для китайской компании, но в принципе он перенасыщен,

— объясняет «Газете.Ru» аналитик «ВТБ Капитала» по автопрому Владимир Беспалов, — Нынешняя ситуация связана с глобальным дефицитом микрочипов, а производственных мощностей здесь более чем достаточно».

В случае, если на российском рынке решит прочно закрепиться еще один игрок из Китая, ситуация с общей недозагрузкой мощностей лишь усугубится, а для привлечения клиентов автомобили неизвестного в стране бренда придется продавать даже в ущерб рентабельности, добавляет эксперт.

Полезная информация | Лексус — Новокузнецк

Полезная информация | Лексус — Новокузнецк

Закрыть

Назад

ЗАКРЫТЬ

  • С пробегом

  • Финансовые услуги

  • КОРПОРАТИВНЫМ КЛИЕНТАМ

Next steps

Два класса мейотического кроссовера сосуществуют в арабидопсисе: один зависит от MER3, а другой нет Кроссоверы необходимы для завершения мейоза. Недавно были идентифицированы два пути образования кроссовера на основе различных генетических контролей. В одном пути кроссовер ингибирует возникновение другого такого события в зависимости от расстояния.Это явление известно как интерференция. Второй вид кроссовера нечувствителен к помехам. Эти два пути функционируют независимо у почкующихся дрожжей. Только нечувствительные к интерференции кроссоверы встречаются у

Schizosaccharomyces pombe . Напротив, у Caenorabditis elegans встречаются только чувствительные к интерференции кроссоверы. Ситуация с млекопитающими и растениями остается неясной. Mer3 — один из генов, необходимых для образования интерференционно-чувствительных кроссоверов у Saccharomyces cerevisiae .

Результаты: Чтобы выяснить статус кроссовера у растения Arabidopsis thaliana , мы исследовали роль гена A. thaliana MER3 посредством характеристики ряда аллельных мутантов. Все мутанты mer3 показали низкие уровни фертильности и значительное снижение (около 75%), но не полное исчезновение мейотических кроссоверов, при этом количество событий рекомбинации, инициированных у мутантов, было сходным с таковым у дикого типа.Генетический анализ показал, что остаточные кроссоверы у мутантов mer3 не проявляли интерференции в одном наборе соседних интервалов.

Выводы: Мутация в MER3 в Arabidopsis оказалась специфичной для событий рекомбинации, приводящих к чувствительным к интерференции кроссоверам. Таким образом, функция MER3 сохраняется от дрожжей до растений и может существовать у других многоклеточных животных. Arabidopsis , таким образом, имеет по крайней мере два пути образования кроссовера, один из которых приводит к чувствительному к интерференции кроссоверу, а другой — к независимо распределенным кроссоверам.

Рекомендуемые статьиЦитирующие статьи (0)

Copyright © 2005 Elsevier Ltd. Все права защищены.

Рекомендуемые статьи

Цитирующие статьи

HIGH CROSSOVER RATE1 кодирует БЕЛКУ ФОСФАТАЗУ X1 и ограничивает мейотические кроссоверы у арабидопсиса

  • 1.

    Вильнёв, А. М. и Хиллерс, К. Дж. Откуда мейоз? Cell 106 , 647–650 (2001).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 2.

    Мерсье, Р., Мезар, К., Йенчевски, Э., Макайн, Н. и Грелон, М. Молекулярная биология мейоза у растений. Annu. Rev. Plant Biol. 66 , 297–327 (2015).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 3.

    Grelon, M., Vezon, D., Gendrot, G. & Pelletier, G. AtSPO11-1 необходим для эффективной мейотической рекомбинации у растений. EMBO J. 20 , 589–600 (2001).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 4.

    Robert, T. et al. Семейство TopoVIB-подобных белков требуется для образования двухцепочечных разрывов мейотической ДНК. Наука 351 , 943–949 (2016).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 5.

    Hartung, F. et al. Каталитически активные тирозиновые остатки как SPO11-1, так и SPO11-2 необходимы для индукции мейотических двухцепочечных разрывов в Arabidopsis . Растительная клетка 19 , 3090–3099 (2007).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 6.

    Хантер Н. Мейотическая рекомбинация: сущность наследственности. Колд Спринг Харб. Перспектива. Биол. 7 , a016618 (2015).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 7.

    Фердоус, М.и другие. Межгомологичный кроссинговер и синапсис в мейозе Arabidopsis зависят от белка оси хромосомы AtASY3. PLoS Genet. 8 , e1002507 (2012).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 8.

    Rowan, B.A. et al. Карта кроссовера со сверхвысокой плотностью Arabidopsis thaliana , которая уточняет влияние структурных вариаций и эпигенетических особенностей. Genetics 213 , 771–787 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 9.

    Girard, C. et al. AAA-ATPase FIDGETIN-LIKE 1 и геликаза FANCM противодействуют мейотическим кроссоверам с помощью различных механизмов. PLoS Genet. 11 , e1005369 (2015).

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 10.

    Cifuentes, M., Rivard, M., Pereira, L., Chelysheva, L. & Mercier, R. Гаплоидный мейоз в Arabidopsis : образуются и восстанавливаются двухцепочечные разрывы, но без синапсов и кроссоверов. PLoS ONE 8 , e72431 (2013).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 11.

    Берховиц, Л. Э. и Копенгейвер, Г. П. Генетическое вмешательство: не стойте так близко ко мне. Curr. Геномика 11 , 91–102 (2010).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 12.

    Li, Y. et al. HEIP1 регулирует образование кроссовера во время мейоза у риса. Proc. Natl Acad. Sci. США 115 , 10810–10815 (2018).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 13.

    Пятницкая А., Борд В. и Де Муйт А. Скрещивание и застегивание: молекулярные функции белков ZMM в мейозе. Хромосома 128 , 181–198 (2019).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 14.

    Mercier, R. et al. Два класса мейотического кроссовера сосуществуют в Arabidopsis : один зависит от MER3, а другой — нет. Curr. Биол. 15 , 692–701 (2005).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 15.

    Séguéla-Arnaud, M. et al. Множественные механизмы ограничивают мейотические кроссоверы: TOP3α и два гомолога BLM противостоят кроссоверам параллельно с FANCM. Proc. Natl Acad. Sci. США 112 , 4713–4718 (2015).

    PubMed Статья CAS PubMed Central Google ученый

  • 16.

    Serra, H. et al. Значительное повышение кроссовера посредством комбинации HEI10 и recq4a recq4b во время мейоза Arabidopsis . Proc. Natl Acad. Sci. США 115 , 2437–2442 (2018).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 17.

    Марстон, А. Л. и Амон, А. Мейоз: перетасовка контролей клеточного цикла. Нат. Rev. Mol. Cell Biol. 5 , 983–997 (2004).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 18.

    Yang, C. et al. Arabidopsis Cdk1 / Cdk2 гомолог CDKA; 1 контролирует сборку оси хромосомы во время мейоза растений. EMBO J. 39 , 1–19 (2020).

    Google ученый

  • 19.

    Lange, J. et al. Пейзаж формирования, обработки и восстановления двухцепочечных разрывов мейотического мейоза мыши. Cell 167 , 695–708 (2016).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 20.

    Гарсия, В., Грей, С., Эллисон, Р. М., Купер, Т. Дж. И Нил, М. Дж. Интерференция, опосредованная Tel1 (ATM), подавляет образование кластерных мейотических двухцепочечных разрывов. Природа 520 , 114–118 (2015).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 21.

    Lange, J. et al. ATM контролирует мейотическое образование двухцепочечных разрывов. Природа 479 , 237–240 (2011).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 22.

    Serrentino, M.-E., Chaplais, E., Sommermeyer, V. & Borde, V. Дифференциальная ассоциация консервативной SUMO-лигазы Zip3 с мейотическими сайтами двухцепочечных разрывов выявляет региональные вариации в исходе мейотическая рекомбинация. PLoS Genet. 9 , e1003416 (2013).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 23.

    He, W. et al. Регулируемый протеолиз MutSγ контролирует кроссинговер мейоза. Мол. Ячейка 78 , 168–183 (2020).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 24.

    Carballo, J.А., Джонсон, А. Л., Седжвик, С. Г. и Ча, Р. С. Фосфорилирование белка осевого элемента Hop1 с помощью Mec1 / Tel1 обеспечивает мейотическую интергомологическую рекомбинацию. Cell 132 , 758–770 (2008).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 25.

    Brar, G.A. et al. Фосфорилирование и рекомбинация Rec8 способствуют постепенной потере когезинов в мейозе. Nature 441 , 532–536 (2006).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 26.

    Hustedt, N. et al. PP4 дрожжей взаимодействует с гомологом ATR Ddc2 – Mec1 и регулирует передачу сигналов контрольной точки. Мол. Ячейка 57 , 273–289 (2015).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 27.

    Lee, D. H. et al. Комплекс фосфатазы PP4 дефосфорилирует RPA2 для облегчения репарации ДНК посредством гомологичной рекомбинации. Нат. Struct. Мол. Биол. 17 , 365–372 (2010).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 28.

    Wang, S. et al. Комплекс PROTEIN PHOSPHATASE4 способствует транскрипции и процессингу первичных микроРНК в Arabidopsis . Растительная клетка 31 , 486–501 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 29.

    Ву Г., Россидивито Г., Ху Т., Берлянд Ю. и Поэтиг Р. С. Транспортные линии: новые инструменты для генетического анализа в Arabidopsis thaliana . Генетика 200, 35–45 (2015).

  • 30.

    Меламед-Бессудо, К., Иегуда, Э., Стуитье, А. Р. и Леви, А. А. Новый анализ мейотической рекомбинации на основе семян в Arabidopsis thaliana . Plant J. 43 , 458–466 (2005).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 31.

    Berchowitz, L.E. & Copenhaver, G.P. Fluorescent Arabidopsis tetrads: визуальный анализ для быстрой разработки больших наборов данных кроссинговера и кроссинговера интерференции. Нат. Protoc. 3 , 41–50 (2008).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 32.

    Ziolkowski, P.A. et al. Сопоставление гетерозиготных и гомозиготных регионов вызывает ремоделирование реципрокного кроссовера посредством интерференции во время мейоза Arabidopsis . eLife 4 , e03708 (2015).

    PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 33.

    Yelina, N.E. et al. Метилирование ДНК эпигенетически подавляет «горячие точки» кроссовера и контролирует хромосомные домены мейотической рекомбинации в Arabidopsis . Genes Dev. 29 , 2183–2202 (2015).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 34.

    Лоуренс, Э. Дж. И др. Естественная изменчивость TBP-ASSOCIATED фактора 4b контролирует мейотический кроссовер и транскрипцию зародышевой линии в Arabidopsis . Curr. Биол. 29 , 2676–2686 (2019).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 35.

    Choi, K. et al. Arabidopsis Горячие точки мейотического кроссовера перекрываются с нуклеосомами h3A.Z на промоторах генов. Нат.Genet. 45 , 1327–1336 (2013).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 36.

    Ziolkowski, P. A. et al. Естественная вариация и дозировка контрольной мейотической лигазы Е3 HEI10. Arabidopsis кроссоверная рекомбинация. Genes Dev. 31 , 306–317 (2017).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 37.

    Crismani, W. et al. FANCM ограничивает мейотические кроссоверы. Наука 336 , 1588–1590 (2012).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 38.

    Аллен, Р., Накасуги, К., Доран, Р. Л., Миллар, А. и Уотерхаус, П. М. Простая идентификация мутантов с помощью метода обратного скрещивания одного родителя и применения конвейеров картирования на основе секвенирования всего генома. Фронт. Plant Sci. 4 , 362 (2013).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 39.

    Shi, Y. Серин / треониновые фосфатазы: механизм через структуру. Cell 139 , 468–484 (2009).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 40.

    Gingras, A.C. et al. Новый эволюционно консервативный комплекс протеинфосфатазы, участвующий в чувствительности к цисплатину. Мол. Клетка. Proteom. 4 , 1725–1740 (2005).

    CAS Статья Google ученый

  • 41.

    Рамос, Ф., Виллория, М. Т., Алонсо-Родригес, Э. и Клементе-Бланко, А. Роль протеинфосфатаз PP1, PP2A, PP4 и Cdc14 в ответе на повреждение ДНК. Напряжение ячейки 3 , 70–85 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 42.

    Nakada, S., Chen, G. I., Gingras, A. C. & Durocher, D. PP4 представляет собой фосфатазу γh3AX, необходимую для восстановления после контрольной точки повреждения ДНК. EMBO Rep. 9 , 1019–1026 (2008).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 43.

    Chowdhury, D. et al. Комплекс PP4-фосфатаза дефосфорилирует γ-h3AX, образующийся во время репликации ДНК. Мол. Ячейка 31 , 33–46 (2008).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 44.

    Merigliano, C. et al. Роль протеинфосфатазы близнецов (PP2A-B55) в поддержании целостности генома Drosophila . Genetics 205 , 1151–1167 (2017).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 45.

    Кио, М.C. et al. Комплекс фосфатазы, который дефосфорилирует γh3AX, регулирует восстановление контрольной точки повреждения ДНК. Nature 439 , 497–501 (2006).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 46.

    O’Neill, B.M. et al. Pph4-Psy2 представляет собой фосфатазный комплекс, необходимый для дефосфорилирования Rad53 и перезапуска репликационной вилки во время восстановления после повреждения ДНК. Proc. Natl Acad. Sci. США 104 , 9290–9295 (2007).

    PubMed Статья CAS PubMed Central Google ученый

  • 47.

    Liu, J. et al. Протеиновая фосфатаза PP4 участвует в NHEJ-опосредованной репарации двухцепочечных разрывов ДНК. Cell Cycle 11 , 2643–2649 (2012).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 48.

    Фальк, Дж. Э., Чан, А. К., Хоффманн, Э.& Hochwagen, A. Mec1- и PP4-зависимая контрольная точка связывает спаривание центромер с мейотической рекомбинацией. Dev. Ячейка 19 , 599–611 (2010).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 49.

    Pérez-Callejón, E. et al. Идентификация и молекулярное клонирование двух гомологов протеинфосфатазы X из Arabidopsis thaliana . Plant Mol. Биол . 23 , 1177–1185 (1993).

  • 50.

    Мурхед, Г. Б. Г., Де Вевер, В., Темплтон, Г. и Керк, Д. Эволюция протеинфосфатаз у растений и животных. Biochem. J. 417 , 401–409 (2009).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 51.

    Su, C. et al. Комплекс протеинфосфатазы 4 и SMEK1 дефосфорилирует HYL1, способствуя биогенезу miRNA путем антагонизма каскада MAPK у Arabidopsis. Dev. Ячейка 41 , 527–539 (2017).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 52.

    de Felippes, F. F., Wang, J. & Weigel, D. MIGS: miRNA-индуцированное молчание генов. Plant J. 70 , 541–547 (2012).

    PubMed Статья CAS PubMed Central Google ученый

  • 53.

    Климюк, В.I. & Jones, J. D. AtDMC1, гомолог Arabidopsis дрожжевого гена DMC1: характеристика, индуцированная транспозоном аллельная изменчивость и экспрессия, связанная с мейозом. Plant J. 11 , 1–14 (1997).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 54.

    Lim, E.C. et al. DeepTetrad: высокопроизводительный анализ изображений мейотических тетрад путем глубокого обучения в Arabidopsis thaliana .Завод J. 101 , 473–483 (2020).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 55.

    Роуэн, Б.А., Патель, В., Вейгель, Д. и Шнебергер, К. Быстрое и недорогое полногеномное генотипирование путем секвенирования для перекрестной локализации и мелкомасштабного генетического картирования. G3 (Bethesda) 5 , 385–398 (2015).

    Артикул Google ученый

  • 56.

    Choi, K. et al. Гетерогенность по скорости рекомбинации в пределах генов устойчивости к болезням Arabidopsis . PLoS Genet. 12 , e1006179 (2016).

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 57.

    Choi, K. et al. Нуклеосомы и метилирование ДНК формируют частоту мейотических DSB в транспозонах Arabidopsis thaliana и регуляторных областях генов. Genome Res. 28 , 532–546 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 58.

    Zhang, J. et al. Мультибелковый комплекс регулирует чувствительное к интерференции образование кроссовера в рисе. Plant Physiol. 181 , 221–235 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 59.

    Macaisne, N., Vignard, J. & Mercier, R.SHOC1 и PTD образуют XPF-ERCC1-подобный комплекс, который необходим для образования кроссоверов I класса. J. Cell Sci. 124 , 2687–2691 (2011).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 60.

    Ueki, Y. et al. Консенсусный связывающий мотив для протеинфосфатазы PP4. Мол. Ячейка 76 , 953–964 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 61.

    Фернандес, Дж. Б., Сегела-Арно, М., Ларчевек, К., Ллойд, А. Х. и Мерсье, Р. Выявление мейотических кроссоверов в гибридных растениях. Proc. Natl Acad. Sci. США 115 , 2431–2436 (2017).

    PubMed Статья CAS PubMed Central Google ученый

  • 62.

    Wijnker, E. et al. Гомолог Cdk1 / Cdk2 CDKA; 1 контролирует ландшафт рекомбинации у Arabidopsis. Proc. Natl Acad. Sci. США 116 , 12534–12539 (2019).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 63.

    He, Y. et al. Геномные особенности, формирующие картину мейотических «горячих точек» с двойными разрывами цепей кукурузы. Proc. Natl Acad. Sci. США 114 , 12231–12236 (2017).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 64.

    Liu, S. et al. Сайты вставки транспозона Mu и события мейотической рекомбинации совместно локализуются с эпигенетическими метками для открытого хроматина в геноме кукурузы. PLoS Genet. 5 , e1000733 (2009).

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 65.

    Underwood, C.J. et al. Эпигенетическая активация мейотической рекомбинации около центромер Arabidopsis thaliana через потерю h4K9me2 и метилирование ДНК не-CG. Genome Res . 28 , 519–531 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 66.

    Челышева Л. и соавт. Arabidopsis HEI10 — это новый белок ZMM, родственный Zip3. PLoS Genet. 8 , e1002799 (2012).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 67.

    Wang, K. et al. Роль риса HEI10 в формировании мейотических кроссоверов. PLoS Genet. 8 , e1002809 (2012).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 68.

    Reynolds, A. et al. RNF212 представляет собой чувствительный к дозировке регулятор кроссинговера во время мейоза млекопитающих. Нат. Genet. 45 , 269–278 (2013).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 69.

    Qiao, H. et al. Антагонистические роли убиквитинлигазы HEI10 и SUMO-лигазы RNF212 регулируют мейотическую рекомбинацию. Нат. Genet. 46 , 194–199 (2014).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 70.

    Воглар А. и Вильнёв А. М. Динамическая архитектура комплексов репарации ДНК и синаптонемного комплекса в местах мейотической рекомбинации. Ячейка 173 , 1678–1691 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 71.

    Snowden, T., Acharya, S., Butz, C., Berardini, M. & Fishel, R. hMSh5 – hMSH5 распознает соединения Холлидея и формирует специфичный для мейоза скользящий зажим, который охватывает гомологичные хромосомы. Мол. Ячейка 15 , 437–451 (2004).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 72.

    Jessop, L., Rockmill, B., Roeder, G. S. & Lichten, M. Белки, способствующие синапсису мейотических хромосом, противодействуют анти-кроссоверной активности sgs1. PLoS Genet. 2 , e155 (2006).

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 73.

    О, С. Д., Лао, Дж. П., Тейлор, А. Ф., Смит, Г. Р. и Хантер, Н. RecQ геликаза, Sgs1 и эндонуклеаза семейства XPF, Mus81-Mms4, разрешают аберрантные совместные молекулы во время мейотической рекомбинации. Мол. Ячейка 31 , 324–336 (2008).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 74.

    Manhart, C.M. et al. Эндонуклеаза репарации ошибочного спаривания и мейотической рекомбинации Mlh2-Mlh4 активируется за счет образования полимера и может расщеплять субстраты ДНК в trans . PLoS Biol. 15 , e2001164 (2017).

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 75.

    Zakharyevich, K., Tang, S., Ma, Y. & Hunter, N. Определение совместных путей разрешения молекул в мейозе позволяет идентифицировать кроссинговер-специфическую резольвазу. Cell 149 , 334–347 (2012).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 76.

    Ranjha, L., Anand, R. & Cejka, P. Гетеродимер Saccharomyces cerevisiae Mlh2 – Mlh4 представляет собой эндонуклеазу, которая преимущественно связывается с соединениями Холлидея. J. Biol. Chem. 289 , 5674–5686 (2014).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 77.

    Wijeratne, A.J., Chen, C., Zhang, W., Timofejeva, L. & Ma, H.Для нормальной мейотической гомологичной рекомбинации требуется ген танцовщика расставания Arabidopsis thaliana , кодирующий новый белок. Мол. Биол. Ячейка 17 , 1331–1343 (2006).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 78.

    Lu, P., Wijeratne, A.J., Wang, Z., Copenhaver, G.P. & Ma, H. Arabidopsis PTD требуется для образования кроссовера типа I и влияет на частоту рекомбинации в двух разных хромосомных областях. J. Genet. Геномика 41 , 165–175 (2014).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 79.

    De Muyt, A. et al. Мейотический XPF-ERCC1-подобный комплекс распознает промежуточные соединения рекомбинации совместных молекул, способствуя образованию кроссовера. Genes Dev. 32 , 283–296 (2018).

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 80.

    Arora, K. & Corbett, K. D. Консервативный XPF: ERCC1-подобный комплекс Zip2: Spo16 контролирует образование мейотического кроссовера посредством структурно-специфичного связывания ДНК. Nucleic Acids Res. 47 , 2365–2376 (2019).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 81.

    Sato-Carlton, A. et al. Протеиновая фосфатаза 4 способствует спариванию хромосом и синапсису, а также способствует поддержанию перекрестной компетентности с возрастом. PLoS Genet. 10 , e1004638 (2014).

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 82.

    Хендерсон, К. А., Ки, К., Малеки, С., Сантини, П. А. и Кини, С. Циклин-зависимая киназа непосредственно регулирует инициацию мейотической рекомбинации. Cell 125 , 1321–1332 (2006).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 83.

    Лам И. и Кини С. Механизм и регуляция инициации мейотической рекомбинации. Колд Спринг Харб. Перспектива. Биол. 7 , a016634 (2014).

    PubMed Статья CAS PubMed Central Google ученый

  • 84.

    Валентин, Г., Швоб, Э. и Делла Сета, Ф. Двойная роль Cdc7-регуляторного белка Dbf4 во время мейоза дрожжей. J. Biol. Chem. 281 , 2828–2834 (2006).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 85.

    Sasanuma, H. et al.Cdc7-зависимое фосфорилирование Mer2 способствует инициации мейотической рекомбинации дрожжей. Genes Dev. 22 , 398–410 (2008).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 86.

    Wan, L. et al. Cdc28-Clb5 (CDK-S) и Cdc7-Dbf4 (DDK) взаимодействуют, чтобы инициировать мейотическую рекомбинацию у дрожжей. Genes Dev. 22 , 386–397 (2008).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 87.

    Matos, J. et al. Dbf4-зависимая киназа Cdc7 связывает репликацию ДНК с сегрегацией гомологичных хромосом в мейозе I. Cell 135 , 662–678 (2008).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 88.

    Chen, X. et al. Фосфорилирование синаптонемного сложного белка Zip1 регулирует решение о кроссовере / непересечении во время мейоза дрожжей. PLoS Biol. 13 , e1002329 (2015).

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 89.

    Кини, С., Ланге, Дж. И Мохибулла, Н. Самоорганизация инициации мейотической рекомбинации: общие принципы и молекулярные пути. Annu. Преподобный Жене. 48 , 187–214 (2014).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 90.

    Nowack, M. K. et al. Генетическая основа функции циклин-зависимой киназы в Arabidopsis . Dev. Ячейка 22 , 1030–1040 (2012).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 91.

    Culligan, K. M. & Britt, A. B. И ATM, и ATR способствуют эффективной и точной обработке запрограммированных мейотических двухцепочечных разрывов. Plant J. 55 , 629–638 (2008).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 92.

    Garcia, V. et al. AtATM важен для мейоза и соматического ответа на повреждение ДНК у растений. Растительная клетка 15 , 119–132 (2003).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 93.

    Yao, Y. et al. ATM способствует опосредованной RAD51 репарации мейотических DSB посредством межсестринской хроматидной рекомбинации в Arabidopsis .Передний. Plant Sci. 11 , 839 (2020).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 94.

    Villoria, M. T. et al. Фосфатаза PP4 участвует в рекомбинационной репарации ДНК, усиливая резекцию двухцепочечного конца разрыва. Nucleic Acids Res. 47 , 10706–10727 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 95.

    Челышева Л. и соавт. Zip4 / Spo22 требуется для образования СО класса I, но не для завершения синапсиса у Arabidopsis thaliana . PLoS Genet. 3 , e83 (2007).

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 96.

    van Tol, N., Rolloos, M., van Loon, P. & van der Zaal, B.J. MeioSeed: программа на основе CellProfiler для подсчета флуоресцентных семян для анализа частоты кроссовера в Arabidopsis thaliana .Заводские методы 14 , 32 (2018).

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 97.

    Carpenter, A. E. et al. CellProfiler: программное обеспечение для анализа изображений для определения и количественной оценки фенотипов клеток. Genome Biol. 7 , R100 (2006).

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 98.

    Zhang, X., Henriques, R., Lin, S. S., Niu, Q. W. & Chua, N.H. Agrobacterium — опосредованная трансформация Arabidopsis thaliana с использованием метода окунания цветов. Нат. Protoc. 1 , 641–646 (2006).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 99.

    Челышева Л. и др. Простой протокол для изучения динамики хроматина и рекомбинационных белков во время мейоза Arabidopsis thaliana : иммунодетекция когезинов, гистонов и MLh2. Cytogenet. Genome Res. 129 , 143–153 (2010).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 100.

    Lambing, C., Kuo, P. C., Tock, A. J., Topp, S. D. & Henderson, I. R. ASY1 действует как дозозависимый антагонист рекомбинации, управляемой теломерами, и опосредует перекрестную интерференцию в Arabidopsis . Proc. Natl Acad. Sci. США 24 , 13647–13658 (2020).

    Артикул CAS Google ученый

  • 101.

    Sanchez-Moran, E., Santos, J.-L., Jones, G.H. & Franklin, F.C.H. ASY1 опосредует AtDMC1-зависимую интергомологическую рекомбинацию во время мейоза в Arabidopsis . Genes Dev. 21 , 2220–2233 (2007).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 102.

    Хиггинс, Дж. Д., Санчес-Моран, Э., Армстронг, С. Дж., Джонс, Г. Х. и Франклин, Ф. С. Х. Белок синаптонемного комплекса Arabidopsis ZYP1 необходим для синапсиса хромосом и нормальной точности кроссинговера. Genes Dev. 19 , 2488–2500 (2005).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 103.

    Hwang, I. & Sheen, J. Двухкомпонентная схема в передаче сигнала цитокинина Arabidopsis . Nature 413 , 383–389 (2001).

    CAS Статья Google ученый

  • 104.

    Xue, Y. et al. GPS 2.1: Улучшенное предсказание сайтов фосфорилирования, специфичных для киназ, с помощью алгоритма выбора длины мотива. Protein Eng. Des. Sel. 24 , 255–260 (2011).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • Jaguar подтверждает большой внедорожник J-Pace, замену Plus XE и F-type

    • Большой внедорожник J-Pace и замена для XE и F-type — все это в карты, Jaguar подтвердил.
    • Jaguar также заявляет, что возможны «детские Jags», называемые A-Pace или B-Pace.
    • Jaguar опередил членов жюри конкурса World Car of the Year на линейку автомобилей.

      Компания Jaguar подтвердила, что будет производить большой внедорожник J-Pace, который заменит XE и F-type. Мы уже знали об полностью электрическом седане XJ следующего поколения, но это первое официальное слово об остальных.

      О внедорожнике J-Pace говорят уже много лет.Он будет больше, чем F-Pace среднего размера, конкурируя с такими, как BMW X5 и Porsche Cayenne. Мы ожидаем, что J-Pace будет ездить на той же новой платформе, что и XJ EV, и будет использовать новый рядный шестицилиндровый двигатель.

      Jaguar также подтвердил, что седан XE и спорткар F-типа получат «замену», хотя не уточняется, будут ли эти модели прямыми моделями следующего поколения или чем-то немного другим. XE только что был модернизирован к 2020 году, поэтому до нового поколения еще как минимум несколько лет.

      Недавно мы видели шпионские фотографии рестайлинга F-типа, который должен дебютировать к концу года, но неясно, является ли это заменой F-типа, о которой говорит Jaguar. Предыдущие слухи указывали на полностью электрическое второе поколение F-типа, что, по нашему мнению, вполне вероятно, учитывая, что XJ также становится электромобилем.

      Наконец, сделав несколько неожиданный шаг, Jaguar упомянул, что не исключены «значительно менее дорогие« детские Jags »», которые можно было бы назвать A-Pace или B-Pace.Учитывая, что эти модели были упомянуты вместе с другими автомобилями, которые были показаны жюри конкурса World Car of the Year, мы думаем, что они, по крайней мере, частично прошли начальную стадию проектирования. В Jaguar заявили, что маленькие Jags будут иметь право на получение награды World Urban Car в следующем десятилетии, что поставит их в тот же размерный класс, что и такие автомобили, как Kia Soul.

      Электрический XJ должен быть представлен к концу 2019 года, но даты дебюта этих новых моделей неясны. Мы думаем, что J-Pace, скорее всего, появится следующим, возможно, дебютирующий в следующем году как модель 2021 года.Автомобили, представленные жюри, будут последними, разработанными или созданными под влиянием Яна Каллума, который недавно покинул компанию через 20 лет и представил новые модели.

      Ягуар

      Этот контент импортирован из {embed-name}. Вы можете найти тот же контент в другом формате или найти дополнительную информацию на их веб-сайте.

      Держите руки счастливыми и крепко держитесь за руль с этими кожаными перчатками для вождения

      Кожаные перчатки для вождения Riparo Motorsports

      Кожаные перчатки для водителя со стринги

      Кожаные перчатки для вождения Riparo Motorsports

      Стеганые кожаные гоночные перчатки Polo Ralph Lauren

      Этот контент создается и поддерживается третьей стороной и импортируется на эту страницу, чтобы помочь пользователям указать свои адреса электронной почты.Вы можете найти больше информации об этом и подобном контенте на сайте piano.io.

      (PDF) FANCM ограничивает мейотические кроссоверы

      существенно увеличивается (рис. 2B), в диапазоне от

      в среднем 4,5 бивалента на клетку до существенных

      , неотличимых от дикого типа. Большая складка in-

      в образовании бивалентов наблюдалась также в мейозе самок

      в fancm-1 (рис. S3) и fancm-5

      (не показано). Напротив, fancm-1 не восстановил образование хиазмы

      spo11-1 или dmc1 (рис.2),

      , показывающее, что хиазмы, возникающие в веером

      , не зависят от ZMM, но требуют инвазии DSB и

      цепи, катализируемой SPO11-1 и DMC1,

      соответственно.

      Затем мы пометили хромосомы, используя флуоресценцию флуо-

      in situ, и исследовали форму

      бивалентов метафазы I (рис. S4). Этот метод

      определяет, есть ли на каждом плече хромосомы ноль хиазмы или по крайней мере

      одна хиазма. В zip4,

      большинство хромосом не получило хиазмы,

      , тогда как у дикого типа, fancm-1 zip4 и Fancm-1 большинство хромосом

      получили по крайней мере по одной хиазме

      на каждой руке (таблица S2).Это подтверждает

      , что частота хиазмы значительно увеличилась в ширину генома

      , когда fancm была мутирована в zip4, до уровня

      , приближающегося к верхнему пределу числа хиазм

      , которое может быть обнаружено с помощью этого метода —

      nique. Поэтому рекомбинацию измеряли в серии генетических интервалов

      с помощью тетрадного анализа линий с флуоресцентными метками (6,7) (фиг.3 и

      , таблица S3). Рекомбинация была снижена во всех тестируемых интервалах

      в 2–3 раза в zip4 com-

      по сравнению с диким типом, что согласуется с предыдущими находками-

      (3).В fancm-1 zip4 генетические дистанции

      были увеличены в 1,9-3,1 раза по сравнению с

      диким типом (P <10

      −5

      ). Это подтверждает, что мутация

      FA N C M не только восстанавливает образование CO-

      в отсутствие ZIP4, но также повышает частоту CO

      намного выше, чем у дикого типа. В

      fancm-1 (с работающим ZIP4) рекомбинация

      была увеличена даже больше, чем в fancm-1 zip4,

      в среднем на 12% (P <0.05inthreein-

      (отдельных интервалов из шести). Таким образом, при объединении

      fancm-1 с диким типом генетическое расстояние

      увеличивалось во всех восьми тестируемых интервалах на коэффициент

      в диапазоне от 2 до 3,6 (P <10

      -8

      ), который

      подчеркивает важность FANCM в установлении

      верхнего предела частоты CO.

      Разница в частоте CO между

      fancm-1 и fancm-1 zip4 довольно ограничена по сравнению с

      по сравнению с разницей между fancm-1 zip4 и

      дикого типа, предполагая, что частота ZMM

      COs составляет не увеличивается из-за отсутствия FANCM.

      Это было дополнительно подтверждено результатом, что

      количество очагов MLh2, маркер ZMM-

      зависимых хиазм (8), было идентично для дикого типа

      и fancm-1 [11,8 T1,6 (n = 38) и 11,5 T

      2,1 (n = 49), P = 0,5] (рис. 4, A и B). Fur-

      thermore хиазмы, наблюдаемые в fancm-1 zip4

      , не отмечены MLh2 (рис. 4C). Кроме того, количество очагов DMC1

      не изменилось в вентилятор-см-1 (222 T52,

      n = 16) по сравнению с диким типом (215 T37, n = 14,

      рис.S6) (3). Мы не можем исключить возможность

      , что изменение FANCM также не увеличивает DSB,

      , хотя неизменное количество фокусов DMC1

      не поддерживает этого.

      Если дополнительные CO, образующиеся в отсутствие

      FANCM, возникают по не-ZMM-пути, как

      предположено из приведенных выше данных, они должны быть

      нечувствительными к помехам (2,9). Мы измерили интерференцию

      между соседними интервалами (таблицы S4,

      ,

      и S5), используя коэффициент интерференции (6,7) (таблица

      S4), что указывало на сильную интерференцию в четырех парах

      интервалов дикого типа (P <3 × 10

      −4

      ).В отличие от

      , в fancm и fancm zip4, эти отношения

      не отличались от 1 (без помех), но

      отличались от отношений дикого типа (P <

      9,10

      −3

      ), с указанием отсутствия помех

      (таблица S4). Интерференция также была измерена в пределах

      каждого интервала путем вычисления неперентного отношения типов

      (10), которое подтвердило отсутствие обнаруживаемой интерференции

      в fancm zip4 (таблица S5).

      Дополнительные CO, возникающие в вентиляторных сантиметрах, не зависят от

      ZIP4, не имеют маркировки MLh2 и не чувствительны к помехам

      . Эти характеристики

      напоминают MUS81-зависимые СО,

      , которые являются минорной фракцией у дикого типа (11,12).

      Таким образом, мы проверили, были ли дополнительные CO

      MUS81-зависимыми, введя мутацию mus81

      в fancm zip4. Примечательно, что мутанты fancm mus81

      или fancm mus81 zip4 имеют сильный дефект роста

      .Дефект роста fancm mus81 был подавлен за счет мутации RAD51 (рис. 4, D — I). Это

      предполагает, что MUS81 и FANCM имеют повторяющиеся роли в гомологичной рекомбинации во время

      репарации соматической ДНК.

      Несмотря на дефект роста, мейоциты

      можно было получить из растений fancm zip4 mus81 и fancm

      mus81. Хотя мейоз кажется нормальным

      в двойном веером zip4 или одиночном mus81

      (рис. 1F и рис.S7), тройная мутация приводит к мейотической катастрофе

      , показывая отсутствие валентов bi-

      в метафазе I и фрагментации хромосомы

      в анафазе I (рис. 4J), дополнительно утверждая

      , что дополнительные COs появляющиеся в мутанте fancm

      , являются MUS81-зависимыми.

      В двойном мутанте fancm mus81 с функциональным ZIP4

      дефект фрагментации хромосомы

      все еще присутствовал в анафазе I (рис. 4K),

      , что позволяет предположить, что путь ZMM не может восстанавливать

      промежуточные продукты рекомбинации, которые накапливаются

      при отсутствии как MUS81, так и FANCM.

      Однако в fancm mus81, в отличие от fancm zip4

      mus81, структуры, похожие на биваленты, были замечены

      в метафазе I (рис. 4L), до фрагментации

      появилось в анафазе I, что предполагает образование

      хиазм. Кроме того, количество фокусов дикого типа из

      MLh2 (8) наблюдалось при диплотене (9,9 T

      2,1, n = 33) и диакинезе (9,6 T1,8, n = 14) (рис.

      S8). in fancm mus81, что позволяет предположить, что формация

      Рис.2. Мутация FANCM

      восстанавливает бивалентную формулу

      у мутантов zmm.

      (A) Белок FANCM

      с идентифицированными мутациями

      , обозначенными стрелками (ta-

      ble S1). Открытый треугольник

      указывает на положение

      вставки Fancm-9 T-DNA

      . (B) Averagenum-

      бивалентов (синий) и

      пар унивалентов (красный)

      на мужской мейоцит. Число проанализированных клеток

      указано в скобках.

      Бивалентный / унивалентный на мейоз

      DEXDc

      HelicC

      FANCM

      дикий тип (26)

      zip4 (101)

      shoc1 (53)

      msh5 (52)

      shoc1 fancm-7 (23) fancm

      zip4 fancm-5 (33)

      msh5 fancm-8 (23)

      zip4 fancm-3 (21)

      zip4 fancm-1 (49)

      shoc1 fancm-6 (42)

      zip4 fancm- 4 (21)

      zip4 fancm-2 (20)

      zip4 fancm-9 (39)

      fancm-1 (41)

      fancm-9 (34)

      msh5 fancm-1 (24)

      shoc1 fancm-1 (61)

      spo11-1 fancm-1 (36)

      dmc1 fancm-1 (49)

      A

      B

      0

      5

      Wild

      тип zip4 zip4 fancm-1 вентиляторсм -1

      0

      2

      4

      6

      8

      10

      12

      14

      16

      18

      20

      I2a I2b I3c I5c

      Ge сетевой размер (см)

      5

      10

      15

      20

      25

      30

      35

      40

      45

      50

      Генетический размер (см)

      I3b I5d

      9000 I1c Инжир.3. Мейотическая рекомбинация усиливается в отсутствии FANCM. Генетические расстояния в восьми интервалах,

      , измеренные с использованием линий с флуоресцентными метками, были рассчитаны по уравнению Перкинса (20) и получили

      сантиметров. I2a и I2b являются соседними интервалами на хромосоме 2

      и так далее для других пар интервалов

      , как описано в (6) (рис. S5 и таблица S3).

      www.sciencemag.org SCIENCE VOL 336 22 ИЮНЯ 2012 ГОДА 1589

      ОТЧЕТЫ

      25 июня 2012 г. www.sciencemag.org www.sciencemag.org

      Подробнее о Mercedes-Benz G-Class 2021 года

      Mercedes-Benz G-Class 2021 Обзор

      Mercedes-Benz G-Class 2021 года предлагается в следующих подмоделях: внедорожник G-класса, G-класс AMG G 63. Доступные стили включают G 550 4dr SUV 4WD (4.0L 8cyl Turbo 9A) и AMG G 63 4dr SUV 4WD. (4,0 л 8-цилиндровый Turbo 9A). Mercedes-Benz G-Class 2021 года будет иметь полный привод.Доступные трансмиссии включают: 9-ступенчатую автоматическую коробку передач с возможностью переключения передач. Mercedes-Benz G-Class 2021 года имеет пробег 4 года / 50000 миль. базовая гарантия, 4 года / 50000 миль. придорожная гарантия, а на 4 года / 50000 км. гарантия на трансмиссию.

      Что люди думают о Mercedes-Benz G-Class 2021 года?

      Потребительские рейтинги и обзоры также доступны для Mercedes-Benz G-Class 2021 года и все его типы отделки салона. В целом пользователи Edmunds оценивают G-Class 2021 года 5.0 по шкале от 1 до 5 звезд. Обзоры потребителей Edmunds позволяют пользователям анализировать агрегированные отзывы потребителей, чтобы понять, что другие водители говорят о любом транспортном средстве в нашей базе данных. Подробная разбивка рейтингов (включая производительность, комфорт, стоимость, интерьер, внешний дизайн, качество сборки и надежность) также доступны, чтобы предоставить покупателям всестороннее понимание того, почему покупателям нравится G-Класс 2021 года.

      Обзоры экспертов Edmunds

      Эксперты Edmunds составили надежную серию оценок и обзоров для Mercedes-Benz G-Class 2021 года и всех годов выпуска в нашей базе данных.Наш богатый контент включает экспертные обзоры и рекомендации для G-класса 2021 года с подробным описанием уровней отделки и функций, производительности, миль на галлон, безопасности, интерьера и вождения. Edmunds также предлагает экспертные оценки, данные дорожных испытаний и характеристик, долгосрочные дорожные испытания, обзоры первых поездок, видеообзоры и многое другое.

      Процесс нашего обзора

      Этот обзор был написан членом редакционной группы экспертов по автомобильным обозрениям Эдмундса. Наша команда водит каждую машину, которую вы можете купить. Мы подвергаем автомобили тщательным испытаниям, оценивая, как они управляют, и подробно сравнивая их с конкурентами.

      Мы такие же обычные люди, как и вы, поэтому обращаем внимание на разные способы использования автомобилей людьми каждый день. Мы хотим знать, достаточно ли места для наших семей и нашего снаряжения на выходные, и поместится ли наш любимый напиток в подстаканник. Наши редакторы хотят помочь вам принять лучшее решение о машине, которая подходит вашей жизни.

      Какая хорошая цена на новый Mercedes-Benz G-Class 2021 года?

      2021 Mercedes-Benz G-Class G 550 4dr SUV 4WD (4.0L 8cyl Turbo 9A)
      2021 Mercedes-Benz G-Class AMG G 63 4dr SUV 4WD (4.0L 8cyl Turbo 9A)

      Какие автомобили Mercedes-Benz G-класса 2021 года доступны в моем регионе?

      Приобрести объявления об автомобилях, внедорожниках и грузовиках Эдмундса из более чем 6 миллионов автомобилей, чтобы найти дешевый новый, подержанный или сертифицированный подержанный (CPO) Mercedes-Benz G-Class 2021 года для продажа рядом. Просто исследуйте тип автомобиля, который вас интересует, а затем выберите автомобиль из нашей огромной базы данных, чтобы найти дешевые автомобили для продажи рядом с вами. Как только вы определили подержанный автомобиль вас интересуют, просмотрите отчеты AutoCheck об истории автомобилей, прочтите отзывы дилеров и найдите узнать, сколько другие владельцы заплатили за Mercedes-Benz G-Class 2021 года.

      Не могу найти новый Mercedes-Benz G-Classs 2021 года хотите в вашем районе? Рассмотрите более широкий поиск.

      Найдите новый Mercedes-Benz на продажу — 9 отличных предложений из 10 предложений по цене от 14 536 долларов США.

      Почему нужно доверять Эдмундсу?

      Edmunds располагает подробными данными о более чем 6 миллионах новых, подержанных и сертифицированных подержанных автомобилей, включая богатые функции и характеристики уровня отделки салона, такие как: рекомендованная производителем розничная цена, средняя уплаченная цена, информация о гарантии (базовая, трансмиссия и техническое обслуживание), функции (обивка, bluetooth, навигация, сиденья с подогревом, охлаждаемые сиденья, круиз-контроль, помощь при парковке, зажигание без ключа, спутниковое радио, складывающиеся задние сиденья, спущенные шины, тип колеса, размер шин, колесная шина, люк на крыше и т. д.), технические характеристики автомобиля (количество цилиндров двигателя, трансмиссия, мощность двигателя, крутящий момент двигателя, рабочий объем двигателя, трансмиссия), экономия топлива (город, шоссе, комбинированный, запас топлива, запас хода), размеры автомобиля (длина, ширина, вместимость, грузовое пространство ), безопасность автомобиля, реальная стоимость владения. Edmunds также предоставляет инструменты, позволяющие покупателю сравнивать автомобили с аналогичными моделями по своему выбору по гарантии, внутренним характеристикам, внешним характеристикам, техническим характеристикам, экономии топлива, габаритам автомобиля, потребительскому рейтингу, рейтингу edmunds и цвету.

      Сколько MPG у Mercedes-Benz G-Class 2021 года?

      2021 Mercedes-Benz G-Class G 550 4dr SUV 4WD (4.0L 8cyl Turbo 9A), 9-ступенчатая автоматическая коробка передач, неэтилированный бензин премиум-класса (обязательно)
      18 комбинированных миль на галлон,
      17 миль на галлон для города / 19 миль на шоссе

      Mercedes 2021 года -Benz G-Class AMG G 63 4dr SUV 4WD (4.0L 8cyl Turbo 9A), 9-ступенчатая автоматическая коробка передач, неэтилированный бензин премиум-класса (требуется)
      14 комбинированных миль на галлон,
      13 городских миль / 16 миль на галлон на шоссе

      EPA Est . MPG 18
      Трансмиссия 9-ступенчатая автоматическая
      Привод полный привод
      Рабочий объем 4.0 L
      Пассажирский объем НЕТ
      Ширина
      Колесная база 113,8 дюйма
      Длина 189,7 дюйма
      Высота 77,5 дюйма
      Снаряженная масса 5554 фунта

      Стоит ли мне арендовать или покупать Mercedes-Benz G-Class 2021 года?

      Машину лучше взять в лизинг или купить? Спросите большинство людей, и они, вероятно, скажут вам покупка машины — лучший способ.И с финансовой точки зрения это правда, при условии, что вы готовы зарабатывать более высокие ежемесячные платежи, полностью погасите ссуду и сохраните машину на несколько лет. С другой стороны, лизинг может быть менее дорогим вариантом на ежемесячной основе. Также хорошо, если вы любите водить новая машина каждые три года или около того.

      Ознакомьтесь со специальными предложениями по аренде «Мерседес-Бенц»

      Значительное повышение уровня кроссовера за счет комбинации HEI10 и recq4a recq4b во время мейоза арабидопсиса

      Значимость

      Большинство эукариот размножаются половым путем, создавая генетические вариации в популяциях.Половое размножение требует производства гамет посредством деления мейотических клеток. Во время мейоза гомологичные хромосомы спариваются и подвергаются обмену, называемому кроссовером. Кроссовер жизненно важен для селекции сельскохозяйственных культур и остается важным инструментом для объединения полезных свойств. Несмотря на важность кроссоверов для размножения, их уровни, как правило, низкие, от одного до двух образующихся на хромосому, независимо от физического размера хромосомы. Здесь мы производим генетическую инженерию суперрекомбинации Arabidopsis путем усиления основного пути прокроссовера (с использованием дополнительных копий гена HEI10 E3-лигазы) и одновременного удаления основного пути антирекомбинации (с использованием мутаций в генах RECQ4A и RECQ4B спиралей). ).Эта стратегия может привести к значительному увеличению кроссоверов в геномах сельскохозяйственных культур и ускорить селекцию.

      Abstract

      Во время мейоза гомологичные хромосомы подвергаются реципрокным кроссоверам, которые создают генетическое разнообразие и лежат в основе классического улучшения сельскохозяйственных культур. Мейотическая рекомбинация инициируется из двухцепочечных разрывов ДНК (DSB), которые преобразуются в одноцепочечную ДНК, которая может вторгаться в гомологичную хромосому. Полученные совместные молекулы в конечном итоге могут быть разрешены как кроссоверы.В Arabidopsis конкурирующие пути уравновешивают репарацию ~ 100-200 мейотических DSB в ~ 10 кроссоверов на мейоз, причем избыточные DSB восстанавливаются как непересекающиеся. Чтобы смещать репарацию DSB в сторону кроссоверов, мы одновременно увеличили дозу прокроссовера гена лигазы E3 HEI10 и ввели мутации в генах антикроссовера геликазы RECQ4A и RECQ4B . Поскольку HEI10 и recq4a recq4b увеличивают мешающие и не мешающие пути кроссовера, соответственно, они аддитивно комбинируются, давая массивное увеличение мейотической рекомбинации.Интересно, что мы также показываем, что увеличенная дозировка HEI10 увеличивает совпадение кроссовера, что указывает на влияние на интерференцию. Мы также показываем, что паттерны межгомологического полиморфизма и рекомбинации, управляющей гетерохроматином, увеличиваются дистально по направлению к субтеломерам как в HEI10 , так и в recq4a recq4b фонах, в то время как центромеры остаются подавленными кроссовером. Эти результаты обеспечивают генетическую основу для разработки ландшафтов мейотической рекомбинации в геномах растений.

      Мейоз — это консервативное деление клеток, необходимое для полового размножения эукариот, во время которого один раунд репликации ДНК сочетается с двумя раундами хромосомной сегрегации, генерируя гаплоидные гаметы (1). Гомологичные хромосомы спариваются и рекомбинируют во время профазы первого мейотического деления, что может привести к реципрокному обмену, называемому кроссовером (1). Кроссоверы сильно влияют на вариабельность последовательностей в популяциях и создают генетическое разнообразие. Мейотическая рекомбинация также является важным инструментом, используемым во время селекции сельскохозяйственных культур для комбинирования полезных вариантов.Однако число кроссоверов обычно низкое, например, приблизительно от одной до двух на хромосому на мейоз, и может показывать ограниченное хромосомное распределение, что ограничивает улучшение сельскохозяйственных культур. Например, рекомбинация подавляется в больших регионах, окружающих центромеры многих видов сельскохозяйственных культур (2). В этой работе мы стремились использовать наше понимание путей мейотической рекомбинации для генетической инженерии сильно повышенных уровней кроссовера у Arabidopsis .

      Мейотическая рекомбинация инициируется из двухцепочечных разрывов ДНК (DSB), индуцированных трансэстеразами SPO11, которые действуют в виде топоизомеразы VI-подобных комплексов (1) ( SI Приложение , рис.S1 A ). Во время катализа SPO11 ковалентно связывается с ДНК сайта-мишени (3). У почкующихся дрожжей SPO11 затем высвобождается за счет эндонуклеолитического расщепления с помощью комплекса MRX (Mre11-Rad50-Xrs2) и Sae2 / COM1 (4⇓-6). Одновременно экзонуклеазы (Mre11 и Exo1) генерируют 3′-выступающую одноцепочечную ДНК (оцДНК) длиной от сотен до тысяч нуклеотидов (7, 8). Резецированная оцДНК связывается с RecA-подобными белками RAD51 и DMC1, которые способствуют инвазии гомологичной хромосомы и образованию петли смещения (D-петля) (9) ( SI Приложение , рис.S1 A ). Стабилизация D-петли может происходить посредством управляемого матрицей синтеза ДНК с вторгающегося 3′-конца (10) ( SI Приложение , Fig. S1 A ). Промежуточные продукты инвазии цепи могут затем прогрессировать до захвата второго конца и образования двойного соединения Холлидея (dHJ), которое может быть разрешено как кроссовер или непересечение, или подвергаться растворению (1, 10) ( SI Приложение , Рис. S1 А ).

      Консервативный путь ZMM способствует образованию ~ 85% кроссоверов у растений, известных как класс I (1, 10) ( SI Приложение , рис.S1 A ). Мутации в генах ZMM серьезно снижают частоту кроссовера Arabidopsis , вызывая сегрегацию одновалентных хромосом в анафазе I, анеуплоидные гаметы и бесплодие (1). Важно отметить, что ZMM-зависимые кроссоверы показывают интерференцию, где события двойного кроссовера (DCO) разнесены более широко, чем ожидалось случайно (11, 12). Путь ZMM в растениях включает MutS-родственный гетеродимер MSh5 / MSH5, ДНК-геликазу MER3, нуклеазу SHORTAGE OF CROSSOVERS1 (SHOC1) XPF, PARTING DANCERS (PTD), ZIP4 / SPO22, лигазу E3 HEI10 и MutL-родственный MLh2 / MLh4. гетеродимер (1, 10) ( SI Приложение , рис.S1 A ). В пути ZMM ген лигазы HEI10 E3 проявляет чувствительность к дозировке, причем дополнительных копий достаточно для увеличения кроссоверов по всему эухроматину (13). Примерно 15% кроссоверов у растений не обнаруживают интерференции и известны как класс II, которые образуются другим MUS81-зависимым путем (1).

      На основе цитологического измерения Arabidopsis DSB-ассоциированных очагов (например, γh3A.X, RAD51 и DMC1) вдоль мейотических хромосом, по оценкам, на ядро ​​инициируется от 100 до 200 разрывов (14–16).Однако только ∼10 кроссоверов обычно формируются по всему геному (17⇓⇓ – 20), указывая на то, что пути противодействия перекресткам предотвращают созревание большинства событий инициации в кроссоверы (1). Действительно, генетический анализ выявил по крайней мере три различных пути противодействия перекрестной реакции у Arabidopsis : ( i ) ДНК-геликаза FANCM и кофакторы MHF1 и MHF2 (21⇓ – 23), ( ii ) AAA-ATPase FIDGETIN-LIKE1 (24) и ( iii ) RTR-комплекс RECQ4A, ДНК-геликаз RECQ4B, TOPOISOMERASE3α и RMI1 (25⇓⇓⇓ – 29) ( SI, приложение , рис.S1 A ). Например, мутанты recq4a recq4b демонстрируют сильно повышенные невмешательские кроссоверы при анализе в определенные интервалы (26) ( SI Приложение , рис. S1 A ). Считается, что это, в первую очередь, является результатом неспособности растворить события инвазии межгомологической цепи, которые альтернативно репарируются с помощью невмешивающегося перекрестного пути (путей) (21, 24, 26). Поскольку комбинирование мутаций между этими путями, например fancm figl1 , привело к аддитивному увеличению кроссинговера, они отражают параллельные механизмы (24).Следовательно, во время мейоза конкурирующие пути действуют на SPO11-зависимые DSBs, чтобы уравновесить результаты кроссинговера и некроссинговера репарации ( SI Приложение , Fig. S1 A ).

      В этой работе мы исследуем функциональную взаимосвязь между ZMM procrossover и RECQ4 антикроссоверными путями мейотической рекомбинации. Используя комбинацию увеличенной дозировки HEI10 и мутаций recq4a recq4b , мы наблюдаем массивное, аддитивное увеличение частоты кроссовера во всех плечах хромосом.Удивительно, но мы наблюдаем, что увеличенная дозировка HEI10 (далее именуемая HEI10 ) вызывает повышенное совпадение кроссовера, что указывает на влияние на помехи. Мы показываем, что HEI10 и recq4a recq4b увеличения кроссовера смещены в сторону областей с низким межгомологическим расхождением, которые дистальнее центромерного гетерохроматина. Следовательно, и генетическая, и эпигенетическая информация, вероятно, ограничивают активность путей мейотической рекомбинации.

      Комбинация

      HEI10 и recq4a recq4b значительно увеличивает частоту кроссовера

      Повышение кроссовера в HEI10 и recq4a recq4b представляет механически различные эффекты через пути ремонта кроссовера класса I и класса II (, Рис.S1 A ). Поэтому мы стремились проверить, вызовет ли объединение этих генетических фонов дальнейшее увеличение частоты кроссовера. Ранее мы показали, что трансгенная линия « C2 », которая несет дополнительные копий HEI10 , демонстрирует примерно двукратное увеличение кроссоверов во всем геноме по сравнению с диким типом (13) ( SI, приложение , таблица S1). Мы скрестили HEI10 линии C2 с двойными мутантами recq4a recq4b на генетическом фоне Col (13, 26, 28) ( SI Приложение , рис.S1 B ). Предыдущий генетический скрининг выявил аллель EMS recq4a у Лера (26). Поскольку Ler несет естественный преждевременный стоп-кодон в recq4b (26), это обеспечивает двойной мутант recq4a recq4b в Ler ( SI Приложение , Fig. S1 B ). Эти линии были скрещены и идентифицировано потомство F 1 , которое было гетерозиготным по полиморфизму Col / Ler, recq4a recq4b гомозиготным и с или без дополнительных HEI10 копий ( SI Приложение , рис.S1 B ). Эти растения F 1 затем использовали для получения Col / Ler F 2 для перекрестного анализа ( SI Приложение , рис. S1 B ).

      Во время скрещивания мы поддерживали репортер кроссовера 420 FTL в наших линиях, что позволяет измерять генетическое расстояние в субтеломерной области размером ~ 5,1 Mb на хромосоме 3 (30, 31) (рис. 1 A и SI Приложение , рис. S1 B и таблица S2). Это показало, что HEI10 , recq4a recq4b и HEI10 recq4a recq4b — все они значительно увеличивают частоту кроссовера 420 в гибридных фонах Col / Ler на 2.В 7, 3,3 и 3,7 раза соответственно (χ 2 тест , P = 2,73 × 10 −175 , P = 4,92 × 10 −212 и P = 2,80 × 10 — 226 ) (Рис.1 A и SI Приложение , Таблица S2). Однако примечательно, что 420 генетическая дистанция достигла 47 сМ в HEI10 recq4a recq4b , что близко к максимальной наблюдаемой частоте рекомбинации для связанных маркеров (50 сМ) (Рис.1 A и SI Приложение , Таблица S2).Поэтому затем мы попытались использовать генотипирование путем секвенирования (GBS) для создания общегеномных карт с высоким разрешением кроссоверов на этих фонах.

      Рис. 1.

      Комбинация HEI10 и recq4a recq4b значительно увеличивает частоту кроссовера мейоза. ( A ) Генетическое расстояние 420 (в сантиморганах) было измерено во время разведения популяций HEI10 и recq4a recq4b . Все образцы были гетерозиготными по Col / Ler. Повторные измерения показаны черными точками, а средние значения — красными точками.Данные HEI10 были опубликованы ранее (13). ( B ) Хромосомные генотипы показаны для двух репрезентативных особей из популяций дикого типа: HEI10 , recq4a recq4b и HEI10 recq4a recq4b F 2 популяций. Пять хромосом Arabidopsis изображены и имеют цветовую кодировку в соответствии с генотипами Col / Col (синий), Col / Ler (зеленый) или Ler / Ler (красный). Положение центромер обозначено черными кружками. ( C ) Гистограммы, показывающие частоту встречаемости F 2 особей, содержащих разные числа кроссовера в каждой популяции, со средним значением, указанным горизонтальными пунктирными красными линиями.( D ) Генетические карты (в сантиморганах) показаны для каждой хромосомы для HEI10 (синий), recq4a recq4b (пурпурный) и HEI10 recq4a recq4b (красный). Каждая карта отображается рядом с картой дикого типа ( Left ), и маркеры между картами соединяются.

      Мы секвенировали геномную ДНК от 191 до 245 Col / Ler F 2 потомков дикого типа, recq4a recq4b и HEI10 recq4a recq4b F 1 родителей и сравнили их с ранее описанным HEI10. F 2 населения (13) ( SI Приложение , рис.S1 – S6 и таблицы S1 и S3). Мы наблюдали, что recq4a recq4b вызывал в 3,3 раза больше кроссоверов в масштабе всего генома (25 кроссоверов / F 2 индивидов, 95% доверительный интервал ± 0,93) по сравнению с диким типом (7,5 кроссоверов / F 2 , 95% достоверность интервал ± 0,28), что превышает двукратное увеличение, ранее наблюдавшееся в HEI10 (15,1 пересечения / F 2, 95% доверительный интервал ± 0,49) (13) (Рис. 1 B – D и SI Приложение , таблица S1).Если кроссовер HEI10 и recq4a recq4b увеличивается в сочетании чисто аддитивным образом, то мы ожидаем увидеть кроссоверы дикого типа плюс сумму дифференциалов кроссовера HEI10 и recq4a recq4b в HEI10 recq4a recq4 , что эквивалентно 7,5 + 7,6 + 17,4 = 32,5 кроссовера / F 2 . Действительно, это было аналогично наблюдаемому значению для HEI10 recq4a recq4b из 30,8 кроссоверов / F 2 (95% доверительный интервал ± 0.93) (Рис. 1 B – D и SI Приложение , Таблица S1). Для всех популяций физически самые большие хромосомы имели самые длинные генетические карты (Рис. 1 D и SI Приложение , Рис. S7). Вместе эти данные показывают, что повышение уровня кроссовера, вызванное увеличением дозировки HEI10 и потерей RECQ4A RECQ4B антикроссоверских геликаз, сочетается аддитивным образом, что согласуется с независимостью путей кроссовера класса I и класса II в Arabidopsis .

      Чтобы оценить, связана ли повышенная частота кроссовера, вызванная HEI10 и recq4a recq4b , с изменениями фертильности, мы выполнили окрашивание пыльцы по Александру и подсчитали соотношение жизнеспособных и нежизнеспособных зерен. По сравнению с диким типом, HEI10 recq4a recq4b показал значительно более высокую неактивность пыльцы ( P = 6,3 × 10 -4 ), тогда как HEI10 и recq4a recq4b существенно не различались (было выполнено попарное тестирование t . с поправкой на многократное испытание) ( СИ приложение , рис.S8 A и таблица S4). Мы также измерили набор семян и наблюдали, что среднее количество семян на стерни в HEI10 ( P = 1,4 × 10 −4 ), recq4a recq4b ( P = 3,7 × 10 −5 ) и HEI10 recq4a recq4b ( P = 1,8 × 10 −8 ) были значительно сокращены по сравнению с диким типом ( SI, приложение , рис. S8, B и таблица S5), с наибольшим сокращением в HEI10 recq4a. recq4b .Хотя повышенные уровни мейотического кроссовера ассоциируются со значительным снижением фертильности на этом фоне, заметный набор семян все еще наблюдается по сравнению с диким типом в HEI10 (94% дикого типа), recq4a recq4b (95%) и HEI10. recq4a recq4b (71%) ( SI Приложение , рис. S8 B и таблица S5).

      Чтобы выяснить, возникают ли повышенные кроссоверы, наблюдаемые в HEI10 , recq4a recq4b и HEI10 recq4a recq4b , из-за дополнительных DSB или за счет других типов репарации, мы измерили уровни DSB в мейотах с помощью иммуноокрашивания на RAD51 ( гомолог RecA, который опосредует инвазию цепи) и ASY1 (белок домена HORMA, который образует часть оси мейотической хромосомы).Количественная оценка связанных с осью фокусов RAD51 на стадиях лептотены, зиготены и пахитены не показала значительных различий между диким типом и HEI10 , recq4a recq4b или HEI10 recq4a recq4b ( SI Приложение и таблицы SI, приложение , рис. –S8). Это указывает на то, что изменения рекомбинации в HEI10 и recq4a recq4b не имеют обратной связи, чтобы вызвать значительное изменение очагов DSB во время мейоза Arabidopsis .

      Повышение совпадения кроссоверов в

      HEI10 и recq4a recq4b

      Недостаточная дисперсия чисел кроссовера на мейоз происходит из-за действия кроссоверной интерференции (1, 10, 32), что приводит к превышению значений, близких к среднему.Соответственно, мы наблюдаем, что распределение кроссоверов на индивидуум F 2 дикого типа значительно отличается от Пуассона (критерий согласия для распределения Пуассона, P = 0,012) (рис. 2 A ). Наблюдаемые частоты представлены в виде столбцов (серые), происходящих от подобранных частот (красная линия), так что серые столбцы, лежащие выше или ниже нуля на оси y , представляют отклонение от математического ожидания Пуассона (рис. 2 A ). Распределения кроссовера на человека в HEI10 , recq4a recq4b и HEI10 recq4a recq4b также были значительно непуассоновскими ( HEI10 P = 4.23 × 10 −3 , recq4a recq4b P = 1,85 × 10 −5 и HEI10 recq4a recq4b P = 0,0174). Однако популяции с высокой рекомбинацией также показали значительно большую вариацию в числах кроссоверов по сравнению с диким типом (тест Брауна – Левена, HEI10 P = 1,08 × 10 −6 , recq4a recq4b P ≤ 2,2 × 10 −16 , HEI10 recq4a recq4b P ≤ 2,2 × 10 −16 ) (Рис.2 A и SI Приложение , Таблица S1).Поэтому мы стремились изучить распределение пересечений в данных GBS более подробно в отношении интервала между событиями.

      Рис. 2.

      Уменьшение перекрестных помех в HEI10 и recq4a recq4b . ( A ) Графики квадратного корня из частоты общих кроссоверов на F 2 особей дикого типа, HEI10 , recq4a recq4b и HEI10 recq4a recq4b популяций, сгенерированных с использованием пакета Goodfit R.Ожидаемое распределение Пуассона показано красным цветом, а наблюдаемые данные — ниже. Отклонение от математического ожидания Пуассона показано серыми полосами (наблюдаемые данные), падающими либо выше, либо ниже нулевого значения на оси y . ( B ) Диаграмма Upper иллюстрирует подлинные ( цис ) и очевидные ( транс ) двойные кроссоверы, обнаруженные в данных генотипирования F 2 . Оценки плотности ядра построены для наблюдаемых расстояний между кроссоверами (красный) и того же количества случайно выбранных расстояний (синий) для указанных генотипов.Вертикальные пунктирные линии обозначают средние значения. ( C ) I3b и I3c генетические дистанции у дикого типа и HEI10 , а также перекрестная интерференция (1 — CoC) между интервалами I3b и I3c . Повторные измерения показаны черными точками, а средние значения — красными точками.

      Анализ F 2 особей, возникших в результате двух независимых мейозов, не позволяет нам различить подлинные ( цис ) DCO, которые произошли в одном мейозе, или очевидные ( транс ) DCO, которые являются результатом одного кроссовера от двух разных мейозов, которые объединились, чтобы сформировать данную особь F 2 (рис.2 В ). Однако мы применили подход к проверке гипотез, чтобы спросить, значительно ли отличаются наблюдаемые расстояния кроссовера от ожидаемых от распределения Пуассона. Мы рассмотрели каждую особь F 2 отдельно, идентифицировали хромосомы с двумя или более кроссоверами и рассчитали расстояние между ними. Для каждого человека и каждой хромосомы одинаковое количество случайно выбранных позиций использовалось для создания согласованного набора расстояний (рис. 2 B ). В соответствии с действием интерференции расстояния дикого типа были значительно больше, чем соответствующие случайные расстояния (среднее значение = 8.72 Мбайт против 6,91 Мбайт, тест Манна – Уитни Уилкоксона P = 1,39 × 10 −11 ). В HEI10 расстояния были существенно сокращены по сравнению с диким типом, но все же были значительно больше, чем случайные (среднее значение = 6,06 МБ против 5,15 МБ, тест Манна-Уитни Уилкоксона P = 3,88 × 10 −12 ) (рис. 2 В ). Однако как в recq4a recq4b (среднее значение = 3,84 МБ против 3,45 МБ, тест Манна-Уитни Вилкоксона P = 0,08), так и в HEI10 recq4a recq4b (среднее значение = 3.30 МБ против 3,09 МБ, критерий Манна-Уитни Вилкоксона P = 0,257), наблюдаемые расстояния существенно не отличались от случайных (рис. 2 B ). Это ожидается, поскольку повышенные кроссоверы класса II, вызванные r ecq4a recq4b , распределяются случайным образом (26). Мы также заметили, что разница между наблюдаемыми и случайно сгенерированными расстояниями была меньше в HEI10 (1,176 ×) по сравнению с диким типом (1,262 ×). Поэтому мы стремились дополнительно изучить перекрестную интерференцию в HEI10 по сравнению с диким типом.

      Для измерения перекрестной интерференции у дикого типа и HEI10 мы использовали трехцветный FTL-анализ со смежными интервалами I3b и I3c . I3bc позволяет измерять частоту кроссовера в субтеломерной области хромосомы 3 (31, 33) ( I3bc находится в пределах интервала 420 FTL, описанного ранее) (рис. 1 A и 2 C ). Мы использовали проточную цитометрию для измерения наследования флуоресценции пыльцы у дикого типа и HEI10 и рассчитали генетические дистанции I3b и I3c (рис.2 C и SI Приложение , таблицы S9 и S10). И I3b , и I3c показали значительное увеличение частоты кроссовера в HEI10 , что согласуется с нашими предыдущими измерениями 420 2 , оба теста P ≤ 2,2 × 10 −16 ) (рис. 1 A и 2 C и SI Приложение , таблицы S9 и S10). I3b и I3c генетические дистанции были использованы для оценки количества пыльцы DCO, ожидаемой в отсутствие помех, по формуле: ожидаемые DCOs = ( I3b cM / 100) × ( I3c cM / 100) × общее количество пыльцы.Отношение «наблюдаемых DCO» к «ожидаемых DCO» дает коэффициент совпадения (CoC), а помехи рассчитываются как 1 — CoC, так что ноль указывает на отсутствие помех (31, 33) (рис. 2 C и SI Приложение , таблицы S9 и S10). I3bc интерференция (1 — CoC) значительно снизилась с 0,64 у дикого типа до 0,34 у HEI10 2 тест P ≤ 2,2 × 10 −16 ) (рис.2 C и SI Приложение , таблицы S9 и S10).Эти эксперименты показывают, что, хотя HEI10 функционирует в мешающем пути ZMM, более высокая доза HEI10 вызывает повышенное совпадение кроссоверов по сравнению с диким типом, хотя и не в такой степени, как у recq4a recq4b (25) (рис. 2 B ). ).

      Пейзажи кроссовера, межгомологической дивергенции и метилирования ДНК

      Далее мы попытались проанализировать распределение кроссовера вдоль хромосом и связать эти закономерности с другими аспектами организации генома (рис.3). В среднем, 7,5 кроссоверов наблюдались на индивида F 2 дикого типа, 5,6 из которых произошли в плечах хромосом и 1,9 — в перицентромерном гетерохроматине ( SI Приложение , рис. S10 и таблица S11). В HEI10 , recq4a recq4b и HEI10 recq4a recq4b пересечения в плечах увеличились в 2,3, 4,1 и 5 раз соответственно (5,6, 12,9, 23 и 28 пересечений), тогда как перицентромеры увеличились на 1,1. , 1,1 и 1,5 раза соответственно (1.9, 2.1, 2.0 и 2.7), были значительно ниже ( SI Приложение , рис. S10 и таблица S11). В соответствии с предыдущими наблюдениями (13, 34), мы наблюдали, что, несмотря на массивное увеличение кроссовера во всех плечах хромосом, HEI10 , recq4a recq4b и HEI10 recq4a recq4b поддерживают подавление рекомбинации в центромерных областях (рис. 3). . Мы также наблюдали, что субтеломерный регион на длинном плече хромосомы 4 показал подавление кроссоверов, особенно в популяциях recq4a recq4b и HEI10 recq4a recq4b (рис.3). Это может отражать специфичную для клонов перестройку последовательности, такую ​​как инверсия, разделяемую между фонами recq4a recq4b .

      Рис. 3.

      Геномные ландшафты частоты кроссовера, межгомологической дивергенции и метилирования ДНК. ( Верхний ) Графики частоты кроссовера (кроссоверы на 300 кб, нормализованные по количеству проанализированных F 2 особей), измеренные для дикого типа (черный), HEI10 (синий) (13), recq4a recq4b ( фиолетовый) и HEI10 recq4a recq4b (красный).Пять хромосом нанесены на непрерывную ось x , при этом положения теломер ( TEL ) и центромер ( CEN ) обозначены вертикальными линиями. Положение гомологов гена устойчивости к NBS-LRR указано штрихами на оси x . Предполагаемое местоположение инверсии в популяциях, производных от recq4a recq4b , также указано оранжевым прямоугольником Inset . ( Средний ) Как для Верхний , но показывает частоту кроссовера дикого типа (черный) в зависимости от SNP Col / Ler (SNP / 300 kb, зеленый) (35) и метилирования ДНК (% на 10 kb, синий) ( 36).( Нижний ) То же, что и Средний , но показывает частоту кроссовера как дикого типа (черный), так и HEI10 recq4a recq4b (красный) с использованием большего диапазона осей y .

      Мы предположили, что генетические и эпигенетические факторы могут вносить вклад в наблюдаемое теломерное смещение в увеличении кроссовера. Поэтому мы сравнили рекомбинацию с паттернами межгомологической дивергенции Col / Ler (35) (т.е. гетерозиготность) и метилирования цитозина ДНК (36). В пределах хромосомных плеч мы наблюдали, что кроссоверы дикого типа показали положительную взаимосвязь с дивергенцией (все значения были рассчитаны в соседних окнах размером 300 т.п.н., r Пирсона = 0.564 P <2,2 × 10 −16 ), что напоминает ранее наблюдаемые корреляции между исторической рекомбинацией и разнообразием последовательностей (31) (рис. 3 и 4). Напротив, противоположные отрицательные корреляции наблюдались между HEI10 ( r = −0,640 P <2.2 × 10 −16 ), recq4a recq4b ( r = −0,805 P <2,2 × 10 −16 ) и HEI10 recq4a recq4b ( r = −0.810 P <2.2 × 10 −16 ) кроссоверов и расхождения Col / Ler SNP (рис.3 и 4). Это указывает на то, что повышение уровня кроссовера, наблюдаемое в HEI10 recq4a recq4b , смещено в сторону наименее полиморфных областей хромосом. Следовательно, хотя путь репарации класса II, который активен в recq4a recq4b , не полностью ингибируется гетерозиготностью, он показывает предпочтение регионам с более низкой межгомологической дивергенцией.

      Рис. 4.

      Частота кроссовера, межгомологическое расхождение и метилирование ДНК по осям теломер-центромеры хромосомы.Анализ частоты кроссовера у дикого типа (синий), HEI10 (фиолетовый), recq4a recq4b (пурпурный), HEI10 recq4a recq4b (красный), Col / Ler SNP (зеленый) (35) и метилирования ДНК ( black) (36), проанализированы по пропорциональной длине всех хромосомных плеч, ориентированных от теломер ( TEL ) до центромер ( CEN ).

      Для дальнейшего изучения взаимосвязи между кроссоверами и структурной генетической изменчивостью мы сравнили кроссоверы с набором из 47 инверсий Col / Ler (35), которые имеют среднюю длину 33.8 кб и всего 1,59 мб. Для каждого генотипа мы подсчитали перекрытие кроссоверов с инверсиями и сравнили перекрытие инверсий с подобранным набором случайно выбранных интервалов той же ширины. В целом, мы наблюдали, что 8 из 15 425 пересечений перекрывали инверсии, что было значительно меньше, чем 189 перекрытий, наблюдаемых для случайных (χ 2 тест P <2,2 × 10 −16 ). Это согласуется с инверсиями Col / Ler, сильно ингибирующими кроссоверы (35).Отметим также, что нулевые кроссоверы перекрывали инверсию гетерохроматической ручки размером 1,17 Mb на хромосоме 4 (37). Плотно метилированные центромерные районы ДНК были сильно супрессированы кроссовером во всех популяциях, что согласуется с тем, что гетерохроматин ингибирует мейотическую рекомбинацию (36) (Figs. 3 and 4). Кроссоверы отрицательно коррелировали с метилированием ДНК во всех популяциях, но наиболее сильно на фоне высокой рекомбинации (дикий тип r = -0,233 P = 2,13 × 10 -6 , HEI10 r = -0.740 P ≤ 2,2 × 10 −16 , recq4a recq4b r = −0,828 P ≤ 2,2 × 10 −16 и HEI10 recq4a recq4b r = −0,810 P ≤ 2,2 −16 ). Следовательно, хотя комбинация HEI10 и recq4a recq4b вызывает массивное увеличение кроссовера, локализация рекомбинации, по-видимому, ограничивается как дивергенцией межгомологической последовательности, так и хроматином.

      Обсуждение

      Мы показываем, что усиление пути кроссовера ZMM за счет увеличения дозировки гена мейотической E3-лигазы HEI10 при одновременном повышении активности невмешательства репарации за счет мутации гена RECQ4A и RECQ4B , антирекомбинации геликазы достаточно, чтобы вызвать массовое увеличение мейотических кроссоверов Arabidopsis .Это согласуется с классом I и классом II, действующими как независимые перекрестные пути восстановления в Arabidopsis . HEI10 представляет собой высококонсервативную лигазу убиквитин / SUMO E3 с неизвестными мишенями во время мейоза Arabidopsis , который может включать другие факторы ZMM (1, 10, 38). У растений HEI10 ассоциируется с парными гомологичными хромосомами на протяжении всей профазы мейоза, показывая постепенное ограничение небольшим количеством фокусов, которые соответствуют местам кроссовера (39, 40). Мы предполагаем, что HEI10 действует, чтобы количественно способствовать репарации кроссовера пути ZMM в сайтах рекомбинации посредством переноса SUMO или убиквитина.Неожиданно мы показали, что увеличенная дозировка HEI10 вызывает более высокое совпадение кроссовера и, следовательно, уменьшение генетической интерференции. Кроссовер-интерференция моделируется как механическая сила, которая, как считается, передается через ось мейотической хромосомы и / или синаптонемный комплекс (SC) (41). Следовательно, HEI10 может изменять факторы рекомбинации в фокусах репарации и снижать их чувствительность к интерференционному сигналу, тем самым увеличивая вероятность ZMM-зависимого обозначения кроссовера.В качестве альтернативы HEI10 может изменять передачу сигнала помехи как таковую, например, если компоненты оси или SC являются мишенями SUMO / убиквитина.

      Хеликазы RECQ4 обладают биохимически охарактеризованной активностью в ( i ) разборке D петель и ( ii ) декатенации dHJs (42⇓⇓ – 45) и, таким образом, могут способствовать некроссоверным результатам на множественных стадиях рекомбинации после инвазии цепи. В мутанте recq4a recq4b , вероятно, сохраняются нерепарированные суставные молекулы, которые вместо этого репарируются как не мешающие кроссоверы класса II (26).Мы показываем, что комбинация генетического фона, увеличивающая кроссоверы класса I и класса II, достаточна для того, чтобы вызвать массовое и аддитивное увеличение рекомбинации с 7,5 до 31 кроссовера на Arabidopsis F 2 особи. Однако, учитывая, что ∼100–200 очагов DSB были цитогенетически обнаружены у Arabidopsis , вероятно, сохраняется способность к дальнейшему увеличению кроссинговера (14–16). Так как пути противодействия перекрестности Arabidopsis не демонстрируют полной избыточности (21, 24, 26, 46), комбинация мутаций в путях FANCM , RECQ4A-RECQ4B и FIGL1 может вызвать дальнейшее увеличение кроссовера (34) .Кроме того, гомолог Arabidopsis MutS MutS действует для подавления кроссоверов, особенно когда гомологичные хромосомы являются полиморфными (47), и, следовательно, введение мутаций msh3 может еще больше усилить рекомбинацию у гибридов. Использование msh3 является привлекательным, так как оно может уменьшить предвзятость по отношению к кроссоверам, наблюдаемым в расходящихся регионах в HEI10 recq4a recq4b .

      Примечательно, что эффекты HEI10 и recq4a recq4b являются наиболее сильными в увеличении кроссоверов в эухроматине.Следовательно, у видов сельскохозяйственных культур с большими гетерохроматическими областями эти стратегии могут наиболее сильно усиливать рекомбинацию в субтеломерном эухроматине (2). Интересно, что у кукурузы <3% генома было идентифицировано как истощенное по нуклеосомам, активная рекомбинация и вносящая вклад в большинство наследственных вариаций (48), а это означает, что увеличение кроссоверов в этих областях, вероятно, повлияет на наследование ключевых признаков. Чтобы разблокировать рекомбинацию в перицентромерных регионах, может потребоваться модификация эпигенетической информации.Однако, поскольку растительный гетерохроматин поддерживается множеством взаимодействующих систем эпигенетических меток, включая метилирование ДНК, h4K9me2, h4K27me1 и h3A.W (49), эти различные модификации могут иметь дифференцированные функции в контроле мейотической рекомбинации (36, 50, 51). . Важно отметить, что также известно, что баланс гетерохроматических систем варьируется между видами. Например, островки метилирования ДНК CHH встречаются рядом с активными генами у кукурузы, что не проявляется у Arabidopsis (52).В заключение, расширенная адаптация генетического фона может еще больше смещать репарацию мейотических DSB в перекрестные судьбы, что может ускорить селекцию и улучшение сельскохозяйственных культур.

      Материалы и методы

      Растительные материалы.

      Arabidopsis линий, использованных в этом исследовании: Col HEI10 , линия C2 (13), Col recq4a-4 (N419423) (28), Col recq4b-2 (N511130) (28), и линия Ler recq4a (W387 *) (26).Генотипирование recq4a-4 выполняли с помощью ПЦР-амплификации с использованием олигонуклеотидов recq4a-F и recq4-wt-R для дикого типа и recq4a-F и recq4-mut-R для recq4a-4 . Генотипирование recq4b-2 проводили с помощью ПЦР-амплификации с использованием олигонуклеотидов recq4b-wt-F и R для дикого типа и олигонуклеотидов recq4b-mut-F и R для recq4b-2 . Генотипирование мутации recq4a в Ler было выполнено с помощью ПЦР-амплификации с использованием олигонуклеотидов recq4a-Ler-F и R и последующего расщепления продуктов ПЦР рестрикционным ферментом ScrFI, что дает продукты ∼160 п.н. для дикого типа и продукты ∼180 п.н. для . recq4a .Наличие трансгена HEI10 тестировали с помощью ПЦР-амплификации с использованием олигонуклеотидов HEI10-F и HEI10-R. Олигонуклеотидные последовательности представлены в SI Приложение , Таблица S12.

      Измерение частоты кроссовера с использованием линий с флуоресцентными метками.

      Генетическое расстояние 420 измеряли с помощью микроскопического анализа флуоресценции семян, как описано (30, 31). I3bc генетические дистанции и коэффициент совпадения были измерены с помощью флуоресцентной пыльцы и проточной цитометрии, как описано (31).Статистический анализ частоты кроссовера FTL и измерения интерференции проводили, как описано (13, 31).

      Иммуноцитологический анализ.

      Хромосомные спреды материнских клеток пыльцы Arabidopsis и иммуноокрашивание ASY1 и RAD51 получали, как описано (53). Индивидуальные клетки получали в виде Z-пакетов по 10 оптических срезов по 0,2 мкМ каждый. Проекция максимальной интенсивности для каждой клетки была визуализирована с использованием ImageJ, и фокусы RAD51, связанные с осью мейотической хромосомы, были подсчитаны вручную.Использовали следующие антитела: α-ASY1 (53) (крыса, разведение 1: 300) и α-RAD51 (54) (кролик, разведение 1: 300). Микроскопию проводили с использованием микроскопа DeltaVision Personal DV (Applied Precision / GE Healthcare), оборудованного камерой CDD Coolsnap HQ2 (Photometrics). Захват изображения был выполнен с использованием программного обеспечения SoftWoRx версии 5.5 (Applied Precision / GE Healthcare).

      Генотипирование путем секвенирования.

      Геномная ДНК

      Ler была секвенирована, и считанные данные были сопоставлены со сборкой генома TAIR10 с использованием Bowtie2.Варианты сайтов вызывались с помощью SAMtools и BCFtools. Сайты были отфильтрованы для удаления сайтов с качеством <100 и> 2,5 × среднее покрытие и повторное замаскирование (15). Набор из 481 252 SNP (средний интервал = 248 п.н.) был выбран для анализа с использованием конвейера TIGER (36, 55). ДНК экстрагировали из растений F 2 и использовали для создания библиотек GBS, и были идентифицированы кроссоверы между «полными» положениями SNP. Для всех наборов данных пересечение было разрешено до среднего расстояния 1409 п.н. Файлы данных секвенирования FastQ доступны в ArrayExpress, доступ к E-MTAB-5949.

      Для создания генетических карт были использованы генотипы GBS из каждой библиотеки для вызова «маркерных» генотипов с интервалами в 1 мегабайт. Эти генотипы использовались с пакетом R Rqtl для создания генетических карт с использованием функции картирования Холдейна. Пакет R goodfit использовался для сравнения наблюдаемых показателей кроссовера на индивидуума с ожиданием Пуассона. Для анализа местоположений кроссоверов мы использовали генетическое определение центромер как смежных регионов, окружающих пробелы в сборке центромер, которые показывают отсутствие кроссоверов у дикого типа (56).Мы определили окружающие области с более высоким, чем в среднем, метилированием ДНК как перицентромеры (36). Плечи хромосом были определены как остальная часть генома. Линия HEI10 C2 содержит транслокацию между хромосомами 3 (∼159,900 п.н.) и 4 (∼20,780,000), связанных с трансгеном HEI10 , что приводит к ложным перекрестным вызовам в этих местах. По этой причине 74 пересечения в этих позициях были замаскированы для дальнейшего анализа.

      Благодарности

      Мы благодарим Грегори Копенгейвера (Университет Северной Каролины, Чапел-Хилл) за I3bc , Авраама Леви (Институт Вейцмана) за 420 , Криса Франклина (Университет Бирмингема) за антитела ASY1 и RAD51 и Гардон Институт визуализации для доступа к микроскопам.Эта работа была поддержана грантами Исследовательского совета биотехнологии и биологических наук (BBSRC) (BB / L006847 / 1), BBSRC-Meiogenix IPA (BB / N007557 / 1), Европейской исследовательской сети по сотрудничеству в области наук о растениях / BBSRC » DeCOP »(BB / M004937 / 1), сеть Мари-Кюри« COMREC »FP7 ITN-606956, Европейский исследовательский совет (SynthHotspot CoG), Благотворительный фонд Гэтсби (GAT2962), исследовательская стипендия Университета Королевского общества и Фонд Беттенкур Шюллера. .

      Сноски

      • Авторский вклад: H.S., C.L., C.H.G., D.C.N., R.M. и I.R.H. спланированное исследование; H.S., C.L., C.H.G., S.D.T. и D.C.N. проведенное исследование; C.J.U., P.A.Z., M.S.-A. и J.B.F. внесены новые реагенты / аналитические инструменты; H.S., C.L., C.H.G., S.D.T., D.C.N. и I.R.H. проанализированные данные; и H.S., C.L., C.H.G., R.M. и I.R.H. написал газету.

      • Заявление о конфликте интересов: использование HEI10 для увеличения мейотической рекомбинации заявлено в заявке на патент Великобритании номер GB1620641.9, поданной 5 декабря 2016 г. Кембриджским университетом.Патенты были депонированы Institut National de la Recherche Agronomique на использование RECQ4 для управления мейотической рекомбинацией в растениях (EP3149027).

      • Эта статья представляет собой прямое представление PNAS.

      • Размещение данных: данные секвенирования FastQ были депонированы в базе данных ArrayExpress, https://www.ebi.ac.uk/arrayexpress/ (инвентарный номер E-MTAB-5949).

      • Эта статья содержит вспомогательную информацию на сайте www.pnas.org/lookup/suppl/doi:10.1073 / pnas.1713071115 / — / DCSupplemental.

      генерирует мейотические кроссоверы без узлов Холлидея

      1. Нэнси М. Холлингсворт2 и
      2. Стивен Дж. Брилл 2,3
      1. 1 Отдел биохимии и клеточной биологии, Институт клеточной биологии и биологии развития, SUNY Stony Brook, Stony Brook, Нью-Йорк 11794-5215, США; 2 Кафедра молекулярной биологии и биохимии, Университет Рутгерса, Пискатауэй, Нью-Джерси 08854, США

      Во время мейоза рекомбинация между гомологичными хромосомами создает физическую связь, необходимую для правильной хромосомы. сегрегация в первом делении мейоза.В течение многих лет парадигма, используемая для объяснения молекулярного механизма рекомбинации была моделью репарации двухцепочечных разрывов (DSBR) (Fig. 1; Szostak et al. 1983). (Определения аббревиатур, используемых в этом обзоре, в порядке их появления, можно найти в таблице 1.) Одной из ключевых особенностей этой модели является то, что рекомбинация инициируется образованием запрограммированных DSB (двухцепочечных разрывов). Специфический для мейоза белок, ответственный за катализ этих разрывов, представляет собой похожий на топоизомеразу белок под названием Spo11 (Bergerat et al.1997; Кини и др. 1997). Идентификация и функциональный анализ гомологов Spo11 из самых разных организмов, включая червей, плодовых мух, делящиеся дрожжи и млекопитающие, указывает на то, что репарация запрограммированных DSBs является универсальным признаком мейотической рекомбинации (Keeney 2001). Второй ключевой особенностью модели является генерация промежуточного звена рекомбинации, называемого двойным соединением Холлидея (dHJ). Дифференциальное разрешение этого промежуточного продукта было предложено для определения образования кроссовера (CO) по сравнению с некроссовером. (NCO) хромосомы.Однако недавние достижения показывают, что решение о том, приведет ли событие рекомбинации к CO или NCO хромосома возникает намного раньше, вскоре после образования DSB (Allers and Lichten 2001a; Hunter and Kleckner 2001; Clyne et al. 2003). Кроме того, исследования недавно открытой эндонуклеазы Mus81 показывают, что, помимо разрешения dHJ, CO могут быть образуются в результате процессинга промежуточных продуктов, не связанных с dHJ (Heyer et al. 2003; Osman et al. 2003). Решение о том, какой перекрестный путь использовать, по-видимому, варьируется между организмами и, следовательно, может быть эволюционным. значительный (de los Santos et al.2003 г.).

      Рисунок 1.

      Модель DSBR в мейозе. Показаны дуплексные цепи ДНК двух несестринских хроматид из пары гомологичных хромосом. (Гомолог 1 красный; Гомолог 2 синий). Мейотические DSB восстанавливаются после резекции 5′-конца и образования промежуточного соединения SEI. Удлинение вторгающейся цепи удлиняет D-петлю до тех пор, пока SEC не инициирует второй раунд синтеза ДНК.Перевязка свободные концы создают совместную молекулу, содержащую дГП. Разрешение dHJ в противоположном смысле (например, показаны черные вставки здесь) приводит к образованию CO, тогда как расщепление в том же смысле (например, расщепление скрещенных цепей) приводит к унтер-офицер. Разрешение состоит из двух этапов: симметричного расщепления для получения дуплексной ДНК с зазубринами (открытых кареток) и лигирования зарубки.5′-концы цепей ДНК представлены точками, 3′-концы представлены стрелками, а синтез ДНК обозначен пунктирными линиями.

      Таблица 1.

      Определение аббревиатур в порядке появления

      Модель репарации двухцепочечных разрывов для мейотической рекомбинации

      Модифицированная версия Szostak et al.(1983) Модель DSBR показана на рисунке 1. Многие из промежуточных продуктов рекомбинации, предсказываемых этой моделью, непосредственно наблюдались у почкующихся дрожжей, и ген были идентифицированы продукты, необходимые для обработки различных промежуточных продуктов рекомбинации (Smith and Nicolas 1998). Помимо SPO11 , большое количество дополнительных генов, роли которых еще не поняты, необходимы для образования DSB (Keeney 2001). 5′-концы по обе стороны от разрыва резецированы для получения одноцепочечных (ss) 3′-хвостов.Для резекции требуется тример комплекс белков, содержащих Rad50, Xrs2 и Mre11, а также Sae2 / Com1 (Smith and Nicolas 1998). Один из 3′-хвостов вторгается в дуплекс гомологичной хроматиды, тем самым вызывая D-петлю или одностороннее вторжение (SEI). промежуточный (Хантер и Клекнер, 2001). Вторжению в гомологичную хромосому способствуют два гомолога recA, Rad51 и мейоз-специфический белок, Dmc1, как а также наличие барьера для репарации сестринских хроматид, опосредованной мейоз-специфической киназой Mek1 (Bishop et al.1992; Ван и др. 2004 г.). Синтез ДНК расширяет вторгающуюся нить до тех пор, пока смещенная нить в D-петле не перекрывается в достаточной степени для отжига с 3′-хвост на другой стороне разрыва для создания промежуточного звена захвата второго конца (SEC). Синтез ДНК и лигирование создают интактный dHJ-содержащий промежуточный продукт (Schwacha and Kleckner 1995). Разрешение обоих HJ в одном направлении создает NCO-хромосому, тогда как разрешение стыков в противоположных направлениях. Направления создает хромосому CO.Было показано, что резольвазы HJ от прокариот, такие как RuvC и RusA, создают симметричные зарубки в нитях с одинаковой полярностью у HJ, приводящие к образованию дуплексных продуктов с зазубринами (West 1997). Простое лигирование этих разорванных продуктов восстанавливает неповрежденные дуплексы. Эта версия модели DSBR предполагает, что эукариотические Резольвазы HJ разрешают HJ с помощью аналогичного механизма.

      Недавние данные лабораторий Лихтена и Клекнера поставили под сомнение идею о том, что как хромосомы CO, так и хромосомы NCO происходят из ди-джеев.Например, существуют мутантные условия, при которых HJ не разрешаются, а CO значительно снижается. Тем не менее формирование хромосом NCO не затрагивается (Allers and Lichten 2001a; Clyne et al. 2003). Эти результаты подтверждают аргумент, что восстановление DSB может происходить двумя отдельными путями во время мейоза почкующихся дрожжей — a Путь CO, который включает образование полностью зрелых промежуточных продуктов dHJ, и путь NCO, который этого не делает (Fig. 2). Предполагается, что NCO возникают путем смещения протяженной вторгающейся нити с последующим повторным отжигом до 3′-хвоста на другая сторона разрыва (зависимый от синтеза отжиг цепей или SDSA; для обзора см. Paques and Haber 1999).Кинетические исследования образования различных промежуточных продуктов рекомбинации во время мейоза в клетках дикого типа подтверждают это. точка зрения (Аллерс и Лихтен 2001a; Хантер и Клекнер 2001).

      Рисунок 2.

      Альтернативная модель для генерации NCO в мейозе почкующихся дрожжей. Имеющиеся в настоящее время данные свидетельствуют о том, что промежуточные соединения SEI становятся склонны к формированию CO, если они восстанавливаются посредством пути DSBR, предположительно из-за предвзятого разрешения dHJ в направление CO ( слева от пути ).Однако промежуточное соединение SEI может быть нарушено, чтобы позволить репарации проходить через путь SDSA, что приводит к NCO продукты ( правый путь ).

      Эндонуклеаза Mus81

      * участвует в метаболизме ДНК в митотических и мейотических клетках

      Хотя многие белки, необходимые для опосредования различных этапов пути DSBR, были обнаружены, то, что уже давно Остается неуловимым идентификация эукариотической резольвазы HJ.В последние несколько лет было много споров о том, что относительно того, может ли эндонуклеаза Mus81 представлять этот Святой Грааль рекомбинации (Haber and Heyer 2001; Heyer et al. 2003). Белок Mus81 имеет гомологию с семейством белков XPF / Rad1, участвующих в эксцизионной репарации нуклеотидов ДНК. Mus81 действует как гетеродимер со вторым белком, называемым Mms4, в почкующихся дрожжах, Saccharomyces cerevisiae , и Eme1 в делящихся дрожжах, Schizosaccharomyces pombe (Boddy et al.2001; Калираман и др. 2001). Белок-партнер человека для Mus81 был назван как Mms4, так и Eme1 (Ciccia et al. 2003; Ogrunc and Sancar 2003). Для простоты в данном обзоре комплексы Mus81 / Mms4 и Mus81 / Eme1 будут обозначаться как Mus81 * .

      генов MUS81 / MMS4 / EME1 были идентифицированы независимо несколькими разными лабораториями, и мутантных фенотипов mus81 / mms4 / eme1 согласуются с ролью в репарации ДНК (Haber and Heyer 2001).В митотических клетках мутанты mus81 / mms4 проявляют чувствительность к агентам, повреждающим ДНК, таким как метилметансульфонат (MMS) и камптотецин (CPT), которые являются считается, что они останавливают репликационные вилки и генерируют DSB в результате проблем с репликацией ДНК (Prakash and Prakash 1977; Interthal and Heyer 2000; Doe et al. 2002; Bastin-Shanower et al. 2003). Mus81 * обычно не требуется для репарации DSB в вегетативных клетках, однако мутанты mus81 / mms4 устойчивы к агентам, продуцирующим DSB, таким как ионизирующее излучение и блеомицин (Prakash and Prakash 1977; Xiao et al.1998; Boddy et al. 2000; Interthal and Heyer 2000). Mus81 физически взаимодействует с рекомбинационным белком Rad54 у почкующихся дрожжей и с контрольной точкой повреждения ДНК делящихся дрожжей. киназа Cds1 (Boddy et al., 2000; Interthal, Heyer, 2000). Mus81 является ядерным белком и в клетках человека рекрутируется на участки УФ-индуцированного повреждения, особенно в S-фазе (Fu and Xiao 2003; Gao et al. 2003). Эти наблюдения согласуются с идеей, что Mus81 * играет роль в спасении остановившихся вилок репликации.Кроме того, mus81 и mms4 являются синтетически летальными с мутантами SGS1 ( RQh2 в делящихся дрожжах), консервативной 3’– 5′-ДНК-геликазы, которая, как известно, необходима для стабильности генома (Boddy et al. 2000). ; Mullen et al. 2001). Эта летальность может быть устранена путем предотвращения гомологичной рекомбинации, предполагая, что Mus81 * действует на некоторый тип промежуточного продукта рекомбинации в митотических клетках (Fabre et al. 2002; Bastin-Shanower et al. 2003).

      У делящихся и почкующихся дрожжей мутантов mus81 / mms4 / eme1 имеют тяжелые мейотические фенотипы.У делящихся дрожжей жизнеспособность спор снижается до ≤1% при высоком уровне хромосом. неправильная сегрегация (Boddy et al. 2001). В почкующихся дрожжах, в зависимости от температуры и фона штамма, до 90–100% диплоидов mus81 / mms4 задерживаются в профазе в результате необработанных промежуточных продуктов рекомбинации, запускающих контрольную точку мейотической рекомбинации. (де лос Сантос и др., 2001, 2003). У тех редких тетрад, которые образуются, жизнеспособность спор снижается до ~ 40% (Interthal and Heyer 2000; de los Santos et al.2003 г.). У обоих дрожжей эти фенотипы вызваны неспособностью восстанавливать специфичные для мейоза DSB как дефекты мейотической прогрессии. и жизнеспособность спор обеспечивается мутациями, предотвращающими инициацию рекомбинации (Boddy et al. 2001; de los Santos et al. 2001; Kaliraman et al. 2001). Ясно, что Mus81 * играет важную роль в мейотической рекомбинации как у S. pombe , так и у S. cerevisiae . Тогда возник критический вопрос: каков механизм его действия?

      Модель I: Mus81

      * раскалывает неповрежденные HJ

      Mus81 * было предложено действовать на этапе разрешения HJ пути DSBR, отчасти потому, что частично очищенный Mus81 * из делящихся дрожжей и клеток человека, как наблюдалось, расщеплял интактные HJ in vitro (рис.3D; Boddy et al. 2001; Chen et al. 2001). Кроме того, мейотические CO снижены на mus81 как у делящихся, так и у почкующихся дрожжей (хотя и в разной степени), тогда как частота NCO не затрагивается или даже повышается. (Де лос Сантос и др., 2003; Осман и др., 2003; Смит и др., 2003). Это ожидаемый результат для мутанта резольвазы, предполагающий, что dHJ являются предшественниками CO и что NCO образуются через механизм, не связанный с dHJ, такой как SDSA. Однако важно отметить, что, хотя эта идея получила прямую поддержку в у почкующихся дрожжей нет физических данных, демонстрирующих, что dHJ являются предшественниками CO в делящихся дрожжах.Самый убедительный Доказательством в поддержку идеи о том, что Mus81 является резольвазой HJ, является тот факт, что многие из мутантных фенотипов mus81 / mms4 / eme1 , включая неправильное расщепление мейотических хромосом и неактивность спор у делящихся дрожжей, чувствительность к ДНК повреждающие агенты и синтетическая летальность с rqh2 эффективно подавляются сверхэкспрессией rusA , бактериальной резольвазы с высокой специфичностью в отношении HJ (Boddy et al.2001; Doe et al. 2002; Odagiri et al. 2003 г.). Этот аргумент предполагает, что rusA напрямую замещает активность Mus81 * . Однако подавление могло быть косвенным. Напр., Сверхэкспрессия rusA также частично подавляет дефекты, проявляемые клетками rqh2 , в которых отсутствует 3′-к-5′-геликаза, а не эндонуклеаза (Doe et al. 2000).

      Рисунок 3.

      Субстрат-специфичность Mus81 * in vitro. ( A D ) Обобщение результатов различных исследований расщепления с использованием rMus81 * с субстратами, представленными в порядке эффективности расщепления. Наиболее эффективные субстраты ( A ) хорошо расщепляются из-за наличия 5′-конца в их ответвлениях (обозначено черной точкой). Расщепление этих субстраты (светлая пунктирная стрелка) направлены на половину витка спирали выше этого 5′-конца (pRF, вилка псевдорепликации).( A, вставка ) Этот механизм согласуется с расщеплением зарубленных HJ в цепи, противоположной зарубке. Эффективное расщепление для остальных субстратов ( B D ) требуется избыток фермента над субстратом. Субстрат регрессивной отстающей цепи (RLS, панель B ) расщепляется в противоположной цепи, в то время как субстрат Y ( C ) расщепляется перед ответвлением. Дальнейшее увеличение концентрации фермента приводит к уничтожению подвижных HJ. на нескольких сайтах на 5′-стороне мобильного ядра.( E ) Контраст продуктов расщепления HJ, полученных симметричным расщеплением с помощью RuvC (разорванные дуплексы), по сравнению с нелегируемым лоскутом и продукты разрыва производства Mus81 * . Эти продукты с 5′-лоскутом могут изомеризоваться в 3′-лоскуты, которые затем обрабатываются Mus81 * с образованием только молекул с разрывом.

      Идея о том, что Mus81 * расщепляет интактные HJ, осложнялась открытием того факта, что рекомбинантные почкующиеся дрожжи, делящиеся дрожжи и человеческий Mus81 * , продуцируемый в Escherichia coli (обозначенный rMus81 * ), имеют значительное предпочтение для 3 ′ -лопаточные структуры над интактными ГП (рис.3, ср. A и D; Калираман и др. 2001; Doe et al. 2002; Ciccia et al. 2003 г.). Первичной детерминантой оптимальной активности rMus81 * in vitro, по-видимому, является наличие разрыва в субстрате. Картографические исследования показывают, что свободный 5′-конец направляет расщепление к восходящей нити на половине спирального витка 5 ‘зарубки (Bastin-Shanower et al. 2003; Osman et al. 2003). Это довольно неспецифическое требование приводит к эффективному расщеплению нескольких разветвленных ДНК-субстратов, включая 3′-створки, вилки псевдорепликации (pRF), D-петли и разорванные HJ (рис.3А; Калираман и др. 2001; Doe et al. 2002; Gaillard et al. 2003; Осман и др. 2003; Whitby et al. 2003 г.). Однако при анализе в присутствии молярного избытка фермента частичный субстрат HJ, содержащий единственный 3’-конец на соединение, иногда называемое регрессивным субстратом отстающей цепи (RLS; Fig. 3B), эффективно расщепляется на той же цепи, что и HJ с разрывом (Gaillard et al. 2003; Osman et al. 2003). Кроме того, простой субстрат Y (рис. 3C), который предпочитается родственной нуклеазой XPF-ERCC1, расщепляется выше точки ветвления.Хотя эндонуклеазная активность rMus81 * на субстратах RLS и Y является субоптимальной, их расщепление предполагает наличие дополнительных детерминант. для активности rMus81 * in vitro. Все группы согласны с тем, что интактные HJ являются очень плохим субстратом для rMus81 * (рис. 3D).

      В отличие от rMus81 * , частично очищенные препараты Mus81 * с меткой эпитопа из экстрактов клеток S. pombe (TEV-Mus81 * ) активны на интактных HJ (Boddy et al.2001; Gaillard et al. 2003 г.). Было высказано предположение, что способность TEV-Mus81 * расщеплять интактные соединения обусловлена ​​присутствием белкового вспомогательного фактора или посттрансляционной модификации (Gaillard et al. 2003). Mus81 * , частично очищенный от клеток человека, однако, проявляет ту же субстратную специфичность, что и рекомбинантные комплексы, делая маловероятно, что предпочтение 3′-лоскутов и pRF по сравнению с HJ, проявляемое ферментами, продуцируемыми бактериями, вызвано отсутствие посттрансляционной модификации (Constantinou et al.2002). Основываясь на предпочтении Mus81 * для разорванных HJs, было предложено, что Mus81 * расщепляет неповрежденные соединения по механизму «зазубрины / противодействия» (Gaillard et al. 2003). В этом случае первое сокращение Mus81 * будет медленным и ограничивающим скорость. Эта зарубка делает переход более гибким и более подходящим основанием для Mus81 * , поэтому предполагается, что второй разрез будет почти одновременным с первым. Альтернативное объяснение различий Однако наблюдаемое между TEV-Mus81 * и rMus81 могло происходить из примесей, присутствующих в сырой фракции TEV-Mus81 * .Таким образом, разрешение этого парадокса потребует сравнения rMus81 / Eme1 из клеток E. coli с высокоочищенным Mus81 * из клеток S. pombe .

      Расщепление HJ, наблюдаемое Mus81 * , несимметрично и поэтому оставляет лоскуты и промежутки на HJs, которые не могут быть восстановлены простым лигированием (Fig. 3E; Boddy et al. 2001; Constantinou et al. 2002). Следовательно, если Mus81 устраняет неповрежденные HJ, он делает это с помощью механизма, не похожего на RuvC / RusA.Идея о том, что эукариотическое разрешение HJ механически отличается от прокариотических резольваз, хотя и является интригующим, но подвергается сомнению открытием канонического RuvC-подобного активность в клетках человека. Эта активность, называемая резолвазой А, эффективно разрезает интактные HJ симметрично, чтобы сделать лигируемые, линейные, разорванные дуплексы, зависит от активности миграции ветвей и биохимически отделим от Mus81 * (Constantinou et al.2002). Взятые вместе, биохимические данные делают маловероятным, что in vivo субстрат Mus81 представляет собой интактный HJ.

      Дальнейшие доказательства того, что Mus81 * не требуется для расщепления интактных HJs, получены из мейотических исследований с использованием почкующихся дрожжей (de los Santos et al. 2001, 2003). В этом организме dHJ могут быть непосредственно проанализированы (Schwacha and Kleckner 1995). В то время как HJs, как ожидается, будут накапливаться в мутанте резольвазы, mms4 демонстрирует снижение частоты dHJs во время мейоза по сравнению с диким типом.Кроме того, эффект mms4 на кроссинговер был, самое большее, двукратным и, по-видимому, зависел от размера хромосомы. Наконец, избыточная экспрессия rusA не влияла на мейотические дефекты либо mus81 , либо mms4 у почкующихся дрожжей (de los Santos et al. 2003). Следовательно, Mus81 * не требуется для генерации основной массы мейотических СО в почкующихся дрожжах. Этот факт, в сочетании с наблюдением, что dHJs предшественник большинства мейотических COs, предоставляет убедительные доказательства того, что Mus81 * не расщепляет интактные HJs у почкующихся дрожжей.

      Модель II: Mus81

      * расщепляет 3′-створки, образованные путем частичного смещения цепи и пути рекомбинации отжига

      mus81 / mms4 диплоиды явно образуют необработанные промежуточные продукты рекомбинации во время мейоза почкующихся дрожжей, о чем свидетельствует остановка профазы, вызванная контрольной точкой мейотической рекомбинации и тем фактом, что значительное количество нерепарированных DSB остаются в поздние сроки в мейозе.Основываясь на предпочтении Mus81 * in vitro 3′-лоскутах, а также на открытии класса совместных молекул, в которых гетеродуплексная ДНК находится с одной стороны от dHJs (Рис. 4; Allers and Lichten 2001b), альтернативная модель была предложена для функции Mus81 * (de los Santos et al. 2001). В этой модели было предложено сформировать подмножество dHJ путем смещения 3′-конца расширенной D-петли и его последующего отжиг на другую сторону разрыва.Если вновь синтезированная ДНК на этой цепи длиннее резецированного 3′-хвоста на другой стороне разрыва может образоваться 3′-лоскут, который затем будет расщеплен Mus81 * (рис. 4). Сходные модели, вызывающие расщепление 3′-лоскута с помощью Mus81 * в митотических клетках, также были предложены (Fabre et al. 2002; Bastin-Shanower et al. 2003).

      Рисунок 4.

      Роль Mus81 * в расщеплении 3′-створок.Модель II предполагает, что большинство мейотических промежуточных продуктов SEI преобразуются в COs посредством пути DSBR ( осталось ). Однако в подмножестве промежуточных продуктов SEI проникающая цепь может быть чрезмерно удлиненной ( справа ). В этом случае вторая нить захватывается не D-образной петлей, а удлиненной нитью после смещения. Любой 3′-створки, возникающие в результате отжига прядей, являются подложками для Mus81 * (светлая пунктирная стрелка). На этом пути гетеродуплексная ДНК находится рядом с dHJ, а не между ними.

      Бутковые дрожжи имеют два генетически разделимых пути образования мейотических кроссоверов

      Модель 3′-створок (II) предполагает, что существует два пути для генерации СО: один использует MUS81 – MMS4 , а другой нет. MSh5 и MSH5 кодируют специфичные для мейоза гомологи MutS, которые не играют роли в репарации несоответствия, но вместо этого требуются для продвижения CO между гомологичные хромосомы (Ross-Macdonald and Roeder 1994; Hollingsworth et al.1995). Подобно Mus81 и Mms4 / Eme1, Msh5 и Msh5 действуют вместе как гетеролигомер (Pochart et al. 1997). Удаление MSh5 и / или MSH5 снижает кроссинговер в два-три раза и жизнеспособность спор до ~ 40%. Интересно, что COs, которые встречаются у мутантов msh5 , не обнаруживают генетической интерференции (Novak et al. 2001). Интерференция — это явление, при котором СО распределяются по геному, возможно, чтобы гарантировать, что каждая хромосома получает хотя бы один.Поскольку СО необходимы для правильной сегрегации мейоза I, дефекты интерференции могут привести к хромосомному неправильная сегрегация или нерасхождение в первом делении мейоза. При отсутствии помех летальность спор наблюдается в диплоидах msh5 / msh5 вызвано нерасхождением хромосом (Ross-Macdonald and Roeder 1994; Hollingsworth et al. 1995). Напротив, СО, остающиеся в диплоидах mms4 , демонстрируют интерференцию, и летальность спор не вызвана нерасхождением (de los Santos et al.2003 г.). msh5 mms4 диплоидов демонстрируют шестикратное снижение кроссинговера и только ∼20% жизнеспособных спор, подтверждая, что эти гены определяют два независимые пути для генерации кроссоверов, MSh5 – MSH5 -зависимый путь помех (обозначен как класс I) и MUS81 – MMS4 -зависимый путь невмешательства (класс II).

      Открытие двух разных путей CO у почкующихся дрожжей может объяснить, почему жизнеспособность спор снижается до гораздо меньшей степень у почкующихся дрожжей mus81 диплоидов по сравнению с делящимися дрожжами mus81 мутантов (40% vs.<1%). У делящихся дрожжей ни один из углекислого газа не оказывает влияния на продукты гена, необходимые для данного класса. I пути (например, MSh5 и MSH5 ) отсутствуют в геноме S. pombe (Munz 1994; Villeneuve and Hillers 2001). Следовательно, хотя путь MUS81 – MMS4 составляет относительно небольшую долю CO в почкующихся дрожжах, он отвечает за большую часть, если не все, СО в делящихся дрожжах (рис. 5).

      Рисунок 5.

      Роль Mus81 * в создании CO без HJ. Модель III предполагает, что мейотические промежуточные соединения SEI имеют три судьбы в зависимости от организма. и выбор пути. Все организмы используют SDSA для производства NCO (, центр ). Интерферирующие СО класса I встречаются в организмах, содержащих MSh5 – MSH5 , и возникают по пути DSBR ( осталось ).Предполагается, что невмешивающиеся СО класса II возникают в результате действия Mus81 * на промежуточном звене SEC ( справа ). Промежуточный продукт SEC обеспечивает мишени для расщепления Mus81 * в D-петле и на полусоединении (светлые пунктирные стрелки). Расщепление на этих участках приводит к обязательному CO изделие, содержащее 5′-створки и зазоры. Здесь показано, что створки изомеризуются в 3′-створки перед расщеплением во втором раунде. Mus81 * действие.Заполнение промежутков и лигирование завершает образование продукта CO (не показан).

      Ни модель резольвазы HJ, ни модель 3′-лоскута для функции Mus81 * не являются удовлетворительными. Как упоминалось выше, биохимические и генетические данные не подтверждают роль Mus81 * в расщеплении интактных HJ. Проблема с 3′-створчатой ​​моделью заключается в том, что она не дает возможности легко различать CO в путях Класса I и Класса II.Постулируются интактные dHJ в промежуточных звеньях 3′-лоскута, и они должны быть устранены, предположительно той же резольвазой, которая расщепляет соединения, образованные на пути интерференции (рис. 3). При чем тут зависимость МШ5 – МСХ5 ? Самая тревожная особенность этих двух моделей заключается в том, что они специфичны для организма. То есть, Mus81 * должен вести себя как резольваза HJ в мейозе делящихся дрожжей (модель I) и эндонуклеаза с 3′-лоскутом в почкующихся дрожжах. мейоз (Модель II).Наиболее правдоподобной моделью будет та, которая согласуется как с предпочтениями фермента in vitro, и генетические данные обоих дрожжей. Недавно Уитби и его коллеги предложили модель функции Mus81, которая удовлетворяет эти критерии (Осман и др., 2003).

      Модель III: Mus81

      * расщепляет D-петли и полупереходы

      Последние биохимические характеристики активности расщепления rMus81 * и TEV-Mus81 * повышают вероятность того, что D-петли и полусоединения являются субстратами in vivo для эндонуклеазы, в отличие от 3′-закрылков (рис.3; Gaillard et al. 2003; Осман и др. 2003 г.). Эта идея согласуется с анализами, которые показывают, что наличие лоскута не так важно, как наличие 5′-зарубки. (Бастин-Шановер и др., 2003). Эти находки привели к новому предположению, что Mus81 * генерирует COs без образования промежуточного звена dHJ (Fig. 5; Osman et al. 2003). В модели III Mus81 рассекает D-образную петлю на одной стороне разрыва, а полупереход, образованный SEC, на другой стороне. разрыв (рис.5). Это расщепление привело бы к образованию зазоров и / или 5′-створок размером ~ 5 нуклеотидов. Такие лоскуты могут изомеризоваться в 3′-лоскуты и расщепляться Mus81 * , или они могут процессироваться эндонуклеазой 5′-лоскутов, такой как Rad27 в почкующихся дрожжах или Rad2 в делящихся дрожжах (Alleva and Doetsch 1998; Kao et al. 2002). Интересно, что mus81 и rad27 являются синтетически летальными для митотических клеток (Tong et al. 2001). Заполнение и лигирование расщепленных цепей приводит к обязательному CO без образования интактного промежуточного звена dHJ. (Осман и др.2003 г.). Вариант этой модели был независимо предложен Heyer et al. (2003).

      Модель III прекрасно сочетает данные между делящимися дрожжами и почковыми дрожжами. Предполагается, что промежуточное звено SEI является предшественником рекомбинации у обоих организмов. У делящихся дрожжей NCO образуются в результате SDSA, тогда как CO образуются почти исключительно в результате от расщепления Mus81 * (рис. 5; Osman et al. 2003).У почкующихся дрожжей NCO также образуются с помощью SDSA, но CO могут генерироваться двумя независимыми путями. Класс II, невмешательство CO образуются в результате расщепления Mus81 * , подобно делящимся дрожжам. Происходит ли расщепление D-петли Mus81 * до SEC, как показано у Osman et al. (2003) или после SEC (рис. 5) пока не известно. Для интерференционно-зависимых СО класса I промежуточное звено SEC превращается в структуру dHJ, которая затем разрешается, предположительно с помощью механизма, подобного RuvC / RusA, для создания CO.Если Mus81 * расщепляет D-петли перед SEC, то MSh5 – MSH5 может действовать на этапе, способствующем образованию промежуточного звена SEC. Альтернативно, если Mus81 * расщепляется после SEC, MSh5 – MSH5 может предотвращать это расщепление, тем самым позволяя созревать dHJs. Известно, что гомолог MutS, Msh3, напрямую связывается с HJ, так что, возможно, комплексы Msh5-Msh5 также связываются непосредственно с разветвленными соединениями (Alani et al. 1997; Marsischky et al. 1999). Msh5-Msh5 является частью комплекса белков, необходимых для интерференции, который включает Zip1, Zip2 и Zip3 (Agarwal and Roeder 2000).Связывание этого комплекса со стыками развивающихся промежуточных продуктов рекомбинации может создать физический барьер, который предотвращает резку Mus81 * .

      В почкующихся дрожжах CO класса II составляют класс меньшинства, который происходит независимо от CO класса I и NCO. Следовательно, mus81 / mms4 мутанты, как ожидается, будут демонстрировать только небольшое снижение CO и не оказывать вредного воздействия на конверсию генов, что именно то, что наблюдается (de los Santos et al.2003 г.). У делящихся дрожжей кроссинговер происходит в первую очередь, если не полностью, по пути класса II. Следовательно, согласно Модели III, СО следует сильно уменьшить (рис. 5). NCO возникают в результате SDSA после образования D-петли и поэтому не должны подвергаться влиянию. Эти прогнозы согласуются с данные рекомбинации делящихся дрожжей (Осман и др., 2003; Смит и др., 2003). Таким образом, сильная сторона Модели III состоит в том, что наблюдаемые различия в мейотических фенотипах между делением и почкованием дрожжи объясняются не тем, что Mus81 * расщепляет разные субстраты в двух дрожжах, а скорее тем, что расщепление одного и того же субстрата имеет различный относительный вклад к общему количеству мейотических СО в каждом дрожжах.

      rusA подавление делящихся дрожжей mus81 мейотических фенотипов можно объяснить, если промежуточные соединения SEC могут спонтанно переходить в dHJ, тем самым создавая отличные подложки для РусА. Если это происходит, то делящиеся дрожжи не могут нормально разделить эти dHJ, учитывая очень низкий уровень спор жизнеспособность мутантов mus81 . Тот факт, что сверхэкспрессия rusA неспособна подавить почкующиеся дрожжи mus81 мейотических дефектов, может означать, что образование dHJ не может происходить спонтанно в S.cerevisiae , но требует активности таких белков, как Msh5-Msh5. С другой стороны, неспособность rusA подавить мейотические фенотипы почкующихся дрожжей mus81 могла быть связана с очень значительными различиями в поведении мейотических хромосом. двумя дрожжами. Во время мейоза почкующихся дрожжевых грибов гомологичные хромосомы становятся физически связанными за счет образования специфическая для мейоза белковая структура, называемая синаптонемным комплексом (SC; Roeder 1997).Напротив, у делящихся дрожжей гомологи не синапсы и SC не образуется (Bahler et al. 1993). SC может, следовательно, предотвращать доступ RusA к промежуточным продуктам рекомбинации во время мейоза почкующихся дрожжей. Последовательный с этой идеей rusA способен подавлять около mus81 / mms4 фенотипов в вегетативно растущих почкующихся дрожжевых клетках, где SC отсутствует (Bastin-Shanower et al. 2003; Odagiri et al. 2003).

      Семантика разрешения

      Большая часть споров вокруг Mus81 * была связана с тем, является ли это резольвазой HJ или нет.Как генетические, так и биохимические данные подтверждают аргумент против неповрежденные HJ являются целью Mus81 * . Модель III предполагает, что расщепление Mus81 промежуточных продуктов, не являющихся HJ, приводит к образованию COs после дальнейшего процессинга ДНК. События. Если эта модель верна, можно считать, что Mus81 «разрешает» промежуточные продукты рекомбинации. Однако для многих людей термин «резольваза» вызывает в воображении определенную парадигму — парадигму RuvC / RusA-подобных нуклеаз, расщепляющих цепи одинаковой полярности в HJs для создания лигируемых, разорванных, линейных дуплексов.Поэтому для ясности было бы наиболее точным называть Mus81 * не резольвазой, а «эндонуклеазой с разрывом соединения».

      Заключение

      В течение многих лет в моделях рекомбинации предполагалось, что СО в эукариотических клетках будут следовать парадигме бактерий разложения. интактных HJ с помощью RuvC / RusA-подобной резольвазы. Открытие Mus81 * повысило вероятность того, что клетки развили по крайней мере два пути для генерации CO, путь класса I, который следует парадигма разрешения интактного HJ и путь класса II, который может и не быть.В процессе эволюции выбор пути (путей) использование варьировалось у разных организмов (рис. 5). Делящиеся дрожжи, по-видимому, зависят исключительно от пути класса II, что может быть связано с неспособностью гомологичных хромосомы в синапс. Напротив, большинство CO в почкующихся дрожжах происходит по пути класса I и пути класса II. могут существовать в основном в качестве резервной копии, чтобы гарантировать, что любые промежуточные продукты рекомбинации, которые не могут быть преобразованы в неповрежденные dHJs отремонтировать.У червей делеция MSh5 или MSH5 устраняет все CO, указывая тем самым, что мейотические CO в этом организме зависят исключительно от пути Класса I (Рис. 5; Залевский и др. 1999; Келли и др. 2000).

      Одним из результатов наличия двух независимых способов генерации CO является возможность модулировать помехи. Интересно, что mms4 проявляет более сильный фенотип на маленькой хромосоме, которая демонстрирует более низкий уровень интерференции, чем на большой хромосоме. на котором помехи сильнее (Kaback et al.1999; де лос Сантос и др. 2003 г.). Следовательно, степень помех можно регулировать, изменяя частоту, с которой разные пути CO использовал. Двумя крайними случаями являются делящиеся дрожжи, где нет помех и CO генерируются в первую очередь, если не исключительно, путь класса II и черви, где помехи сильны (Hillers and Villeneuve, 2003), а путь класса I, по-видимому, генерирует все CO. Возможно, что млекопитающие, такие как почкующиеся дрожжи, используют оба пути CO. во время мейоза.Хромосомы млекопитающих обнаруживают интерференцию, а MSh5 и MSH5 являются мейоз-специфическими генами, необходимыми для правильного выполнения мейоза; Активность Mus81 * была обнаружена в соматических клетках (de Vries et al. 1999; Broman and Weber 2000; Kneitz et al. 2000). Однако пока неизвестно, следуют ли млекопитающие парадигме червей, в которой все COs MSh5 / MSH5 -зависимы, или парадигме почкующихся дрожжей, в которой меньшая часть CO генерируется Mus81 * .Таким образом, изучение этого очень интересного фермента предложило новый механизм генерации мейотической COs и может в конечном итоге пролить свет на то, как распределение COs регулируется в различных организмах.

      Благодарности

      Мы благодарим Нила Хантера и Майкла Лихтена за полезные комментарии к рукописи. Мы благодарны W. Heyer, G. Smith, C.Макгоуэну, П. Расселу и М. Уитби за обмен идеями / результатами перед публикацией. Исследования в лаборатории N.M.H. при поддержке гранта NIH GM50717 и гранта March of Dimes 1-FY02-754, а исследования в лаборатории S.J.B. поддерживаются NIH грант GM67956.

      Сноски

      • Статья и публикации находятся по адресу http: // www.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *